Monomix MC-NTA IMAC 亲和填料
品牌 | 厂商性质 | 产地 | 货期 |
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赛分科技 | 生产商 | 苏州 | 订货 |
性能特点
适用于纯化组氨酸(His)标签的重组蛋白。
货号 | 规格 | 粒径(µm) | 操作 |
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285560950 | Monomix MC60-NTA CA | 60 µm | 询底价 |
285460950 | Monomix MC60-NTA Ni | 60 µm | 询底价 |
Monomix MC-NTA IMAC填料是一种金属亲和层析填料,适用于纯化组氨酸(His)标签的重组蛋白,这类重组蛋白广泛应用于生物技术领域。该填料以亲水性聚甲基丙烯酸酯微球为基质,粒径为60 μm,孔径为1000 Å,具有较高的物理和化学稳定性。填料表面具有高度亲水性,最大程度地避免了与生物类样品的非特异性吸附。在亲水性表面,以专有连接物链接了能螯合多价金属离子的羧酸基团。
Monomix MC-NTA IMAC填料有两种类型:游离酸型 (Monomix MC-NTA CA)和螯合镍离子型 (Monomix MC-NTA Ni)。游离酸型可用于金属离子去除,也可根据客户要求定制其他金属离子型填料。这两种类型的IMAC填料结构如下图所示。Monomix MC-NTA IMAC填料可重复使用。
填料结构
图 1. Monomix MC60-NTA 化学组成示意图
Monomix MC60-NTA CA
Monomix MC60-NTA CA
图2. Monomix MC60-NTA Ni压力-流速曲线
建议使用纯水或NaCl溶液装柱;常用线性流速下,Monomix MC60-NTA Ni填料背压低
填料稳定性
该填料化学稳定高,可耐受0.1-0.5 M NaOH溶液清洗循环。该填料不耐EDTA及DTT。使用一段时间后需重新补充金属离子。
技术参数
填料类型 | Monomix MC60-NTA Ni Monomix MC60-NTA CA | |
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基质 | 亲水性聚甲基丙烯酸酯 | |
粒径 | 60 µm | |
孔径 | 1000 Å | |
组氨酸标记蛋白(His-protein) 载量/离子交换当量 | ≥30 mg/mL填料 >100 μeq./mL | |
最大线性流速 | ≤1800 cm/h | |
操作温度 | ≤40°C | |
pH适用范围 | 1-13 | |
操作压力 | ≤1 MPa(10 bar) | |
流动相兼容性 | 水溶液,或水和乙腈、丙酮或甲醇的混合物。常用缓冲液:磷酸盐、三羟甲基氨基甲烷(Tris)和醋酸盐,也与6 M盐酸胍、8 M尿素相容 | |
期保存方法 | 50% (v/v) ,保存于20%乙醇中 | |
再生 | 含0.1-0.5 M咪唑的缓冲盐体系 | |
清洗 | 0.1-0.5 M NaOH清洗 |
应用案例
图3. Monomix MC60-NTA Ni纯化组氨酸标记蛋白
上样:样品泵进样30mg/mL,柱留时间5min,UV280nm信号值20mAU-20mAU收集。5min驻留时间。
淋洗:使用50mM PB,1M NaCl,pH8.0冲洗层析柱5CV,UV280nm信号值20mAU-20mAU收集。5min驻留时间。
再平衡:使用平衡液50mM PB,500mM NaCl,pH8.0再平衡层析柱3CV,5min驻留时间。
洗脱:使用洗脱液( 50mM PB,500mM NaCl,500mM 咪唑,pH8.0)洗脱,8CV,5min驻留时间。UV280nm信号值20mAU-20mAU收集。
图4. 组氨酸标记蛋白SEC纯度
Column: Zenix SEC-300 (3μm, 300 Å, 4.6×300 mm)
Mobile phase: 150mM PB,pH 7.0
Flow rate: 1mL/min
Detector: UV 280 nm
Column temperature: 25 ℃
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注:该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案,不可用于临床诊断或治疗等相关用途