CAPCELL PAK MF使用与UG系列相同的经过精密分级的高纯度硅胶作为基材,在表面形成均一的用硅氧聚合物包被薄膜,再导入亲水基团聚氧乙烯基和苯基等疏水基团,并以一定比例进行键合。
含有蛋白质的生物样品注入色谱柱后,蛋白质等大分子受到与填料相结合的亲水基团的空间位阻和因孔径小而产生的尺寸排阻的影响,不被保留而直接溶出。而药物和代谢物这样的小分子化合物则与填料中的疏水性基团进行相互作用(反相分配),从而得到保留并且溶出。CAPCELL PAK MF兼具以上两种分离原理,并具有优越的化学稳定性,无批次间差异,重复性良好,是更理想的前处理色谱柱。
疏水性基团 | 硅胶类型 | 细孔径
(nm) | 粒径
(μm) | 比表面积
(m2/g) | C% | 密度
(μmol/m2) | pH范围 | 极性基团 |
---|
C8 (辛基) | SG | 8 | 5 | 450 | 14 | 1.4 | 2~9* | 聚氧乙烯基 |
Ph (苯基) | SG | 8 | 5 | 450 | 12 | 1.2 | 2~9* | 聚氧乙烯基 |
SCX (磺酸基) | SG | 8 | 5 | 450 | 9 | 0.9 | 2~9* | 聚氧乙烯基 |
*虽然填料本身可在该pH范围内使用,但考虑到蛋白质变性的情况,pH适用范围为2.0~7.5
蛋白质直接通过
分离机理(尺寸排阻与反相分配模式)
样品中的全药物浓度(蛋白质结合型+蛋白质游离型)的测定
CAPCELL PAK MF在线色谱柱除蛋白法指样品注入色谱柱后迅速被流动相稀释,作为分析对象的游离型药物得到保留,而蛋白质在移动的过程中,药物与蛋白质间结合的平衡状态发生大幅度改变,从而使药物进一步从蛋白质中游离出来。就像这样,几乎全部药物在色谱柱上得到了保留。
*和蛋白质结合很强的药物可能会出现回收率低的情况。
批次间差异更小
经聚合物包被处理后,受硅胶基材的影响很小
非常优越的耐久性
分析色谱柱的耐久性
色谱柱:CAPCELL PAK MF Ph-1; 4.6 mm i.d. × 100 mm
流动相:100 mmol/L磷酸盐缓冲液 / CH3CN = 90 / 10, pH 6.98
流 速:1.0 mL/min
温 度:40℃
检 测:UV 254 nm
进样量:20 μL
药物的回收率良好
拥有以上特长的CAPCELL PAK MF色谱柱的三大功能
几种CAPCELL PAK MF色谱柱的使用区分
MF色谱柱的分离模式
反相分配模式:C8 • Ph
以强疏水性物质为分析对象,Ph柱中π电子相互作用也发挥功能。
阳离子交换模式:SCX
利用具有氨基等阳离子的反相分配模式,适用于分析保留困难的强极性物质。
GPC模式:C8 • Ph • SCX
作为亲水基团的聚氧乙烯基体积较大,因此也发挥GPC模式作用。对蛋白质等大分子杂质及亲水性小分子化合物的保留与分离具有分析可能性。
可根据不同官能团对药物的保留时间进行调整
药物的保留行为随疏水性官能团的不同而变化
色谱柱:4.6 mm i.d. × 150 mm
流动相:100 mmol/L磷酸盐缓冲液(pH 6.9)/ CH3CN = 80 / 20
流 速:1.0 mL/min
检 测:UV 254 nm
分离模式为强阳离子交换的SCX,可以对反相模式中保留困难的强极性碱性化合物进行选择性的保留
普鲁卡因胺
碱性化合物普鲁卡因胺极性较强,在疏水性相互作用下(反相分配)很难得到保留。
规格与用途
色谱柱的使用指导
CAPCELL PAK系列色谱柱可以作为分析色谱柱单独使用,但利用前处理柱的除蛋白功能和样品浓缩功能,通过柱切换可实现数倍~40倍的高灵敏度分析。
血中微量药物的分析(单独使用MF色谱柱)
人血浆中的催眠镇静药
小牛血清中的磺胺类药物(抗菌药)
血中微量药物的高灵敏度分析(2色谱柱系统)
柱切换系统
吲哚美辛
人血清中的蛋白质在死体积附近溶出后,吲哚美辛得到保留并溶出,在6.6~8.2分种之间进行柱切换,所得分析结果如下图所示。
在不同分离模式下对人血浆中普鲁卡因胺和N-乙酰普鲁卡因胺的分析
MF柱芯(SCX)- SCX使用例(阳离子交换模式)
使用阳离子交换模式对目标物质进行选择性保留,得到干扰较少的良好色谱图。
前处理色谱柱:MF柱芯(SCX)2.0 mm i.d. × 10 mm
流动相 :100 mmol/L磷酸盐缓冲液 / CH3CN = 80 / 20(pH 7.36)
分析色谱柱 :CAPCELL PAK SCX UG80; 2.0 mm i.d. × 150 mm
流动相 :100 mmol/L磷酸盐缓冲液(pH 6.9)/ CH3CN = 60 / 40
流速 :200 μL/min
检测 :UV 270 nm
进样量 :20 μL
样品 :①普鲁卡因胺(100 ng/mL)②N-乙酰普鲁卡因胺(100 ng/mL)
MF柱芯(Ph-1)-C18使用例(反相分配模式)
前处理色谱柱:MF柱芯(Ph-1)2.0 mm i.d. × 10 mm
流动相 :100 mmol/L磷酸盐缓冲液 / CH3CN = 95 / 5
分析色谱柱 :CAPCELL PAK C18 UG120; 1.5 mm i.d. × 250 mm
流动相 :100 mmol/L磷酸盐缓冲液(pH 6.9)/ CH3CN = 85 / 15
流速 :100 μL/min
检测 :UV 270 nm
进样量 :20 μL
样品 :①普鲁卡因胺(100 ng/mL)②N-乙酰普鲁卡因胺(100 ng/mL)
血中微量药物的高灵敏度分析(3色谱柱系统)
柱切换系统
人血清中卡马西平和苯妥英钠的分析
第一次分离(A+B)
色谱柱:CAPCELL PAK MF柱芯(Ph-1): 4.0 mm i.d. × 10 mm
CAPCELL PAK C18 UG120 S5; 1.5 mm i.d. × 35 mm
流动相:100 mmol/L磷酸盐缓冲液(pH 7) / CH3CN = 90 / 10
流 速:A : 0.5 mL/min B : 0.25 mL/min
温 度:40℃
检 测:UV 254 nm
进样量:100 μL
第二次分离(C)
色谱柱:CAPCELL PAK C18 UG120 S5; 1.5 mm i.d. × 250 mm
流动相:100 mmol/L磷酸盐缓冲液(pH 7) / CH3CN = 30 / 70
流 速:0.1 mL/min
温 度:40℃
可作为LC-MS的前处理色谱柱
人尿中的血清素的分析
MF柱(SCX)可以在挥发性盐条件下调整保留程度,因此可以作为LC-MS的前处理色谱柱来应用。
色谱仪:NANOSPACE SI-1
前处理色谱柱:MF柱芯(SCX): 2.0 mm i.d. × 10 mm
流动相:20 mmol/L CH3COONH4 / CH3CN = 80 / 20, pH 7.2
分析用色谱柱:CAPCELL PAK C18 UG80; 1.5 mm i.d. × 150 mm
流动相:20 mmol/L CH3COONH4 / CH3CN = 20 / 80, pH 7.8
流速:100 μL/min
检测:UV 220 nm
进 样 量:20 μL
样品:male, age 30, fresh urine 30μL, 0.45μm滤膜过滤
产品一览表
■MF C8
产品编号 | 类型 | 粒径
(μm) | 内径
(mm) | 柱长
(mm) |
---|
F60601 | SG80 | 5 | 1.5 | 35 |
F60602 | SG80 | 5 | 1.5 | 50 |
F60599 | SG80 | 5 | 1.5 | 75 |
F60603 | SG80 | 5 | 1.5 | 100 |
F60604 | SG80 | 5 | 1.5 | 150 |
F60570 | SG80 | 5 | 2.0 | 35 |
F60571 | SG80 | 5 | 2.0 | 50 |
F60576 | SG80 | 5 | 2.0 | 75 |
F60572 | SG80 | 5 | 2.0 | 100 |
F60573 | SG80 | 5 | 2.0 | 150 |
F60520 | SG80 | 5 | 4.6 | 35 |
F60521 | SG80 | 5 | 4.6 | 50 |
F60519 | SG80 | 5 | 4.6 | 75 |
F60522 | SG80 | 5 | 4.6 | 100 |
F60523 | SG80 | 5 | 4.6 | 150 |
F12426 | SG80 柱芯 (2PCS) | 5 | 4.0 | 10 |
F12428 | SG80 柱芯 (2PCS) | 5 | 4.0 | 20 |
F12415 | 卡套-10(L) | — | — | 10 |
F12414 | 卡套-20(L) | — | — | 20 |
G : 保护柱