Cells-to-Ct™ 试剂盒
qRT-PCR 一致性

1.经过验证的解决方案，每次实验均可获得一致的结果

2.简单方便的试剂盒，无需 RNA 纯化

3.极高的准确性、重复性和灵敏度

借助 TaqMan™ 基因表达 Cells-to-CT™ 试剂盒，无需 RNA 纯化即可直接使用培养细胞进行表达分析。该试剂盒节省了时间，并提供了一个适用于少量样品的简单工作流程，或者可以轻松整合到自动化的高通量应用中。

TaqMan™ 基因表达 Cells-to-CT 试剂盒的特征为：

• 全面—优化的工作流程包括移除 gDNA 的细胞裂解试剂、RT 酶混合物、缓冲液和新型 TAqMan™ 基因表达预混液
• 快捷—7分钟样品制备，包括在室温下进行 DNase 处理
• 简便—可以在试管或直接在培养板中裂解样品
• 稳健—可以对每个样品10–100,000个细胞进行基因表达分析；结果与从纯化 RNA 中获得的相当
• 高效—含有足够的试剂从100起始样品中生成500实时荧光定量 PCR 结果

TaqMan™ 基因表达 Cells-to-CT™ 试剂盒采用独特的方法裂解培养细胞，同时去除基因组 DNA 并保持 RNA 的完整性，其中包含用于 cDNA 合成的逆转录 (RT) 试剂和用于实时 PCR 分析的 TaqMan™ 基因表达预混液。TaqMan™ 引物⁄探针对单独出售。

简单7分钟样品制备：完整工作流程的一部分
无论您使用的是孔板还是试管，TaqMan™ 基因表达 Cells-to-CT™ 试剂盒均使用所述的简单7分钟样品制备程序（见图），专门设计用于10–100,000培养细胞⁄样品设计。细胞先用 PBS 清洗，再于室温下置于裂解液中裂解5分钟；同时进行 DNase 处理。裂解过程在加入终止液，室温孵育 2 分钟后终止。裂解物现在已经准备好在–20°C 条件下进行逆转录或储存。由于可直接在培养孔（96或384孔）中处理样品，故样品处理和样品损失或转移错误的可能性被降至较低，从而有益于快速、高通量的处理。与传统的多步骤 RNA 分离方案不同，无需加热、清洗或离心。该试剂盒大大简化了耗时费力的30–60分钟流程，将其减少至7分钟。

TaqMan™ 基因表达 Cells-to-CT™ 试剂盒工作流程可通过任何>700,000 TaqMan™ 基因表达测定进行出色的基因表达评估。该试剂盒已通过各种各样的 TaqMan™ 基因表达测定进行了广泛的特异性测试，其性能与通过纯化 RNA 获得的性能相当（见图）。

实现出色的性能和灵敏度
不同于某些将 RT 反应中裂解物的量限制在5%的竞品试剂盒，TaqMan™基因表达 Cells-to-CT™ 试剂盒可以容纳总 RT 反应体积的45%作为细胞裂解物。此外，cDNA 至多可占实时荧光定量 PCR 反应体积的45%。优化的 RT 反应中的较大裂解物体积，以及后续使用 TaqMan™ 基因表达预混液的实时荧光定量 PCR 中的较大 cDNA 体积，可较大限度地提高灵敏度。该预混液可实现精确而准确的靶标扩增，从而能够检测少量靶标，如低表达水平的转录物。

通过将恒定数量的人类细胞与不同数量的小鼠细胞混合来测试检测有限靶标量的能力。使用 TaqMan™ 基因表达 Cells-to-CT™ 制备细胞混合物，并测定这些混合物的小鼠特异性和人特异性基因。利用通过传统方法纯化的 RNA 以同样的方式生成比较数据。数据显示，可检测到少至 10 个小鼠细胞中的 RNA

规格

检测方法：引物-探针检测

产品规格：管装

GC-Rich PCR Performance：高

No. of Reactions：100 次反应

PCR 方法：2 步法 qRT-PCR

聚合酶：AmpliTaq Gold DNA 聚合酶

反应速度：标准

试剂类型：Cell Lysis

样品类型：细胞

适用于（设备）：7000 系统，7300 系统，7500 系统，7900 HT 系统，Applied Biosystems StepOnePlus™ Fast 型实时荧光定量 PCR 系统，StepOne™，标准模式，StepOnePlus™，标准模式

环保功能：所用资源更少、废弃物更少、危害更少

参比荧光染料：ROX（预混）

引物探针兼容性：TaqMan™

产品线：Ambion™，Cells-to-CT™，TaqMan™

产品类型：基因表达 Cells-to-C 试剂盒

纯度或质量等级：UP (Ultra Pure)

逆转录酶：M-MLV

运输条件：干冰

足够用于：100 次反应

内容与储存

包含：
• 终止液：500 µL 管
• DNase I：55 µL 管
• 20X RT 酶混合物：275 µL 管
• 裂解液：5.5 mL 瓶
• 2X RT 缓冲液：5.5 mL 瓶
• TaqMan™ 基因表达预混液：5 m 瓶

将终止液、DNase I 和 20X RT 酶混合物储存在 -20°C 下。
将裂解液、2X RT 缓冲液和 TaqMan™ 基因表达预混液储存在 4°C 下。