Cells-to-Ct™ 试剂盒
qRT-PCR 一致性
1.经过验证的解决方案，每次实验均可获得一致的结果
2.简单方便的试剂盒，无需 RNA 纯化
3.极高的准确性、重复性和灵敏度
Ambion™ Single Cell-to-CT™ 试剂盒包含一个完整经验证的工作流程，适用于含 1–10 细胞样品的基因表达分析。每个试剂盒包含用于样品制备、逆转录、预扩增和 qPCR 的试剂，这些试剂已在仅 5 个步骤即可完成的简单工作流程中一起优化（参见图）。
主要产品特点：
•单细胞实时 RT-PCR 的预优化工作流程
•单细胞分析的较高灵敏度
•性能和重现性优于替代方法
•全套试剂盒方便且易于执行方案
预优化方案可确保成功并节省时间
每个工作流程均从简单的 7 分钟样品制备开始，在此过程中，细胞经过较少的处理即可有效且可重现地裂解为与下游 RT-PCR 兼容的溶液，而无需纯化。随后使用 Superscript™ RT 进行逆转录，使用 TaqMan™ PreAmp 预混液扩增 cDNA，使用 TaqMan™ 基因表达预混液进行 qPCR。所有这四个步骤都可以提供较高灵敏度。在整个程序中，将整个细胞样品保持在同一孔中，因此不会丢失或稀释可能影响灵敏度的珍贵有限材料。
单细胞灵敏度
实时荧光定量 PCR 结果的灵敏度可能受样品制备、逆转录或扩增效率的影响。Single Cell-to-CT™ 试剂盒解决了这些潜在的问题领域，创建了一种能够以较大灵敏度对单个细胞进行可靠、稳健的基因表达分析的解决方案。使用 Single Cell-to-CT™ 试剂盒检测单细胞当量表明，与具有出色技术重现性的 100 细胞样品对照相比，qPCR 结果具有适当的线性和灵敏度（参见图）。与预期一致，单个细胞因其固有的生物异质性而表现出了更大的变异性。此外，通过加入 cDNA 预扩增步骤，可在实时荧光定量 PCR 之前准确扩增靶标。该关键步骤以无偏移的方式增强信号，从而扩展有限样品的分析可能性。显示了使用预扩增的 96 基因检测板的准确度和信号增强（参见图）。
与替代方法相比，具有优异的性能和重现性
使用有机溶剂、玻璃纤维过滤柱或磁珠的传统样品制备方法不适用于单细胞分析，因为样品通过不完全 RNA 沉淀、结合和洗脱出现损失。此外，大多数涉及简单煮沸以裂解细胞的大多数单细胞自行设计方法都缺乏灭活内源性 RNase 以稳定基因表达谱的能力，并可能导致 RNA 的化学裂解和抑制剂残留，包括 gDNA 污染，其可影响所有 qRT-PCR 应用。相比之下，与传统纯化或自行设计煮沸方法相比，Single Cell-to-CT™ 试剂盒表现出优异的单细胞分析灵敏度和重现性（参见图）。
规格4458236
检测方法：引物-探针检测
Purification Time：7 min.
样品类型：细胞
适用于（设备）：7000 系统、7300 系统、7500 系统、7900 HT 快速系统、7900 HT 系统、GeneAmp 9700、GeneAmp™ 2400、StepOne™、快速模式、StepOne™、标准模式、StepOnePlus™、快速模式、StepOnePlus™、标准模式、Veriti 热循环仪
适用于（应用）：2 步 qRT-PCR
环保功能：所用资源更少、废弃物更少、危害更少
包括：400 μL 单细胞 DNase I；4.0 mL 单细胞裂解液（在 4°C 下储存）；400 μL 单细胞终止液；600 μL 单细胞 SuperScript RT；50 mL TaqMan 基因表达 预混液（在 4°C 下储存）；2.1 mL 单细胞 Pre-Amp 混合物；1.2 mL 单细胞 VILO RT 混合物
反应次数：400
引物探针兼容性：TaqMan™
产品线：Ambion™、Cells-to-CT™
反应速度：快速，标准
运输条件：干冰
原始材料量：1-10 个细胞
内容与储存
• 400 µL 单细胞 DNase I
• 4.0 mL 单细胞裂解液（在 4°C 下储存）
• 400 µL 单细胞终止液
• 600 µL 单细胞 SuperScript™ RT
• 50 mL TaqMan™ 基因表达预混液（在 4°C 下储存）
• 2.1 mL 单细胞 Pre-Amp 混合物
• 1.2 mL 单细胞 VILO™ RT 混合物
试剂盒组成部分在 -20°C 下储存，单细胞终止液和 TaqMan™ 基因表达 MasterMix 除外，其在 4°C 下储存。
规格4458237
检测方法：引物-探针检测
Purification Time：7 min.
样品类型：细胞
适用于（设备）：7000 系统、7300 系统、7500 快速系统、7900 HT 快速系统、7900 HT 系统、GeneAmp 9700、GeneAmp™ 2400、StepOne™、快速模式、StepOne™、标准模式、StepOnePlus™、快速模式、StepOnePlus™、标准模式、Veriti 热循环仪
适用于（应用）：2 步 qRT-PCR
环保功能：所用资源更少、废弃物更少、危害更少
包括：50 μL 单细胞 DNase I；0.5 mL 单细胞裂解液（在 4°C 下储存）；50 μL 单细胞终止液；75 μL 单细胞 SuperScript RT；5 mL TaqMan 基因表达 MasterMix（在 4°C 下储存）；265 μmL 单细胞 Pre-Amp 混合物；150 μmL 单细胞 VILO RT 混合物
反应次数：50
引物探针兼容性：TaqMan™
产品线：Ambion™、Cells-to-CT™
反应速度：快速，标准
运输条件：干冰
原始材料量：1-10 个细胞
内容与储存
• 50 µL 单细胞 DNase I
• 0.5 mL 单细胞裂解液（在 4°C 下储存）
• 50 µL 单细胞终止液
• 75 µL 单细胞 SuperScript™ RT
• 5 mL TaqMan™ 基因表达预混液（在 4°C 下储存）
• 265 µL 单细胞 Pre-Amp 混合物
• 150 µL 单细胞 VILO™ RT 混合物
试剂盒组成部分在 -20°C 下储存，单细胞终止液和 TaqMan™ 基因表达 MasterMix 除外，其在 4°C 下储存。
