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线粒体功能

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线粒体功能
1.膜电位 —— 可固定探针
MitoTracker® 染料是用于活细胞线粒体染色的膜电位依赖性探针。MitoTracker® 染料在有活性的线粒体中产生的荧光信号比其在膜去极化的线粒体中产生的荧光信号强,这就提供了从一群细胞中识别出正常细胞的一种方法。经过整个后续的免疫细胞化学、DNA 末端标记、原位杂交或复染过程,MitoTracker® 染料的染色形态仍可保持。MitoTracker® Red CMXRos 与绿色荧光染料同时使用时光谱重叠极少,而 MitoTracker® Orange CMTMRos 与远红外荧光染料是可兼容的。对于那些要求荧光本底极低的实验,MitoTracker® RedCM-H2XRos 和 MitoTracker® Orange CM-H2TMRos 是最佳选择。

2.膜电位 —— 不可固定探针
利用本章节介绍的膜透过性染料,可以对凋亡过程中出现的线粒体膜电位丧失进行快速、简便而可靠的检测。JC-1 是一种阳离子染料,它可以电位依赖性地聚集于线粒体内,表现为发射的荧光从绿色 (525 nm 左右) 变为红色 (590 nm 左右),因而可用于比率测定 。MitoProbe™ DiIC1(5) 和MitoProbe™DiOC2(3) 分析试剂盒中含有羰花青染料,可用于线粒体膜电位研究。DiIC1(5) 染色的细胞可通过配有红色激发滤光片和远红外发射滤光片的流式细胞仪显示;DiOC2(3) 染色的细胞可通过配有蓝色激发滤光片和绿色、红色发射滤光片的流式细胞仪显示。罗丹明 123 和二氢罗丹明 123 易于被有活性的线粒体摄取,而不会诱发细胞毒性效应。这些罗丹明染料的摄取和平衡十分迅速,只需几分钟的时间,而其它膜电位敏感性染料则需要 30 分钟,甚至更久。四甲基罗丹明甲酯或者乙酯 (分别被称为 TMRM 和 TMRE)可与绿色荧光染料一起使用,有效的用于多色检测实验中。

3,线粒体转换孔
线粒体通透性转换孔是由线粒体内膜和外膜成分形成的非特异性通道,可能参与了细胞凋亡和坏死过程中线粒体成分的释放。与单独依靠线粒体膜电位的分析方法相比,Image-iT® LIVE和MitoProbe™转换孔分析试剂盒 (分别用于荧光显微镜检查和流式细胞仪) 可以更为直接地检测线粒体通透性转换孔的开放。Image-iT® LIVE 线粒体转换孔分析试剂盒还包含成像所需的线粒体复染染料 MitoTracker®Red CMXRos。

4.HCS 线粒体健康试剂盒
HCS 线粒体健康试剂盒可同时定量检测两个重要的细胞健康状况
参数:线粒体毒性和细胞毒性。MitoHealth 染料会积聚于活性线粒体内,由此检测线粒体膜电位的改变。试剂盒包括用于检测细胞毒性的 Image-iT® DEAD™ Green 染料,以及一种无法渗入健康细胞但可以渗入细胞质膜受损细胞的染料。这两种指示剂均可被固定和透化处理,因此可实现与其它感兴趣的生物标志物的多重检测。试剂盒中还包括蓝色荧光核染料 Hoechst 33342,其对活细胞和死细胞的 DNA 均可以进行染色。


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