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默克新品,带你领略“无细胞蛋白表达”的魅力

发布时间: 2020-09-07 00:35 来源:默克生命科学

默克新品 ALiCE® KIT:无细胞蛋白质表达试剂盒 (植物细胞裂解物),带你领略“无细胞蛋白表达”的魅力
种草一款无细胞蛋白质表达试剂盒需要几步?来看看,你需要几步就被安利。

来自默克科学家的反馈,强烈安利做蛋白表达的宝宝们看看哦。
“这个产品十分具有吸引力的,节约了大量时间成本以及大幅提高了蛋白纯化产量,good job!另外由于我之前做GPCR纯化比较多,大家知道靶向GPCR的小分子数目占比最多。GPCR纯化初期面临的最大的问题就是表达量低的问题,我认为这个kit对提高GPCR产量可能具有重要的帮助。”

第一步:传统表达的痛点怎么破?
蛋白表达是指用模式生物如细菌、酵母、动物细胞或者植物细胞表达外源基因蛋白的一种分子生物学技术。在基因工程技术中占有核心地位。

以大肠杆菌为代表的原核蛋白表达系统是常用的表达系统,具有表达量高和成本低的优点,但是蛋白质翻译后缺乏加工机制(比如形成二硫键和蛋白糖基化等),且很难保留生物活性。

以甲醇毕赤酵母为代表的酵母蛋白表达系统,具有表达量高,可诱导,糖基化机制接近真核生物等优点,但是部分蛋白产品易降解,表达量不可控。

哺乳动物细胞和昆虫细胞表达系统的主要优点是蛋白翻译加工后机制接近体内的天然形式,容易保留生物活性,缺点是很难高通量表达,且建立稳定细胞系的技术难度大,操作繁琐,生产成本高。

这些传统的体内表达系统都是利用DNA重组实现目的蛋白的表达。然而体内表达一直存在表达量有限,培养成本高、周期长、不正确的蛋白糖基化,还存在内毒素、包涵体,操作技术要求高等瓶颈。

第二步:无细胞蛋白表达,用一次就上瘾
和传统的体内表达不同,无细胞表达系统是以细胞裂解液为基础,在试管中进行的蛋白表达。开放性系统赋予蛋白表达的灵活性,无细胞蛋白表达系统在表达膜蛋白、有毒蛋白、二硫键蛋白、抗体片段等方面具有独特优势。由于可以使用线性模板,利用PCR方法就可以轻松实现在目的基因两侧加入需要的转录和翻译所需的因子,不需要繁琐的载体构建过程。线性模板的使用还可以实现蛋白的高通量合成和筛选。

默克生命科学推出的无细胞蛋白表达试剂盒,仅需简单一步法,即可收获超高产量蛋白!
 
第三步:默克新品,带你领略“无细胞蛋白表达”的魅力
ALiCE® KIT:无细胞蛋白质表达试剂盒 (植物细胞裂解物)
小提示:点击标题可进入官网链接

ALiCE®是一种真核无细胞系统,利用植物细胞裂解物仅需简单的一步法,可将蛋白质产量提升到3mg/mL。


经过500多种蛋白验证,可表达膜蛋白、有毒蛋白等困难蛋白。多家公司已采用ALiCE®快速生产抗原,并用于临床试验。
 
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CFPS700 KIT: 新一代无细胞蛋白质表达试剂盒(小麦胚芽)
小提示:点击标题可进入以下官网链接:
https://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/cfps700?lang=zh&region=CN

新一代无细胞蛋白质表达试剂盒(小麦胚芽)是一种低成本、高灵活性、高产量重组蛋白表达系统,采用便捷的protocol可在一天之内收获高产量的目标蛋白。小麦胚芽无细胞蛋白质表达系统是日本研究所在“人工蛋白工厂”项目中进行全面蛋白表达研究的选择之一:在研究的总共13364种人类蛋白质中,97.2%的蛋白使用了小麦胚芽无细胞蛋白质表达系统。

    已验证可表达多种原核和真核蛋白,包括有毒蛋白
    从PCR产物开始-无需克隆和细胞培养
    不需要优化密码子,即使A/T或G/C高含量的transcripts也适用
    由于其天然结构和真核生物来源,蛋白溶解度高
    无动物成分,无血清
    可线性扩大产量
    对于膜蛋白不需要添加人工脂质体
    可诱导形成二硫键
    低成本,平均每个反应产出10μg蛋白,每个试剂盒提供50个反应

蛋白表达示例


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