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Kromasil 色谱柱的使用与维护

发布时间: 2021-02-25 16:43 来源:诺力昂 Kromasil

Kromasil 色谱柱的使用与维护

色谱柱安装与平衡 

使用经过滤并脱气的流动相 ( 不含任何缓冲液 ) 彻底冲洗 HPLC 泵和管线,确保系统中没有气泡。 按照流向标签 ( 位于色谱柱上 ) 指示的方向将色谱柱一端连接至进样器,另一端不接检测器。将泵流速设置为 0.1 mL/min( 或系统允许最低设置 ) 并在 5 分钟内增大至正常流速。 当色谱柱出口处有溶剂自由流出时停止泵送,擦拭出口端并将其连接到检测器。 以正常流速和约 10-30 倍色谱柱体积的流动相来平衡色谱柱。

检测柱效

强烈建议用户在收到 Kromasil 原装进口色谱 柱 15 天内进行柱效检测,并在整个使用周期内,进行定期的柱效测试,以便随时监测色谱柱的寿命情况。

运行参数 

5 μm 及 3.5 μm 色谱柱最大耐受压力 400 Bar, 2.5 μm 及 1.8 μm 色谱柱最大耐受压力 1000 bar。 最高工作温度不高于 60 ℃。 在使用 Kromasil Classic 系列 C18,C8,C4,Phenyl 色谱柱时,流动相 pH 控制在 1.5-9.5 之间,这样有利于延长色谱柱的使用寿命。

流动相的配置 

仅使用 HPLC 色谱纯溶剂、水、最高纯度的化学品和试剂。 使用前对所有流动相进行过滤和脱气。确保溶剂可互溶。

色谱柱的保存 

色谱柱使用完毕后,应尽可能地冲洗掉残留在色谱柱内的杂质和沉积物。保存在适合的储存溶剂中,储存溶剂可以参考 COA 中建议使用溶剂。储存环境需保持温度稳定、避光,并注意检查 Peek 堵头,防止松动导致柱内溶剂流失。

色谱柱的清洗 

柱压升高,保留时间变化和柱效降低都是色谱柱被污染的表现。 多数情况下,通过正确的冲洗能够解决上述问题。 我们需要谨记的是越早冲洗或再生越会更容易的解决上述问题。

通常具有较强吸附的杂质都集中在色谱柱进口一 端,最简单的方法是对色谱柱进行反冲。反冲的方法只对填装紧密的色谱柱有效,柱性能也不会发生变化。

反冲时,请按照下述的一般步骤,使用特定溶剂对色谱柱进行清洗,并根据不同厂商 的建议进行,以免损坏色谱柱。


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反冲时,请将流动相流速将至正常流速的 1/10-1/5, 并断开检测器。