从研发到质控的核酸样品多质量属性监控流程

生物制品主要指通过基因工程、抗体工程或细胞工程等技术手 段生产获得的源自生物体内的一类药物。由于生物分子本身的 敏感性，生产工艺的微小变化，就可能导致终产品质量属性的 差异，形成高度异质的产品。特别是一些关键质量属性（Critical Quality Attributes, CQAs），它们将进一步影响药物的临床 效果。因此，高可信度地识别 CQAs，并对药物生产过程导致 这些CQAs含量水平变化的过程和条件监控，可以帮助提升药物 的安全性和有效性。 以信使RNA（messenger RNA，mRNA）疫苗为代表性的寡 核苷酸生物制品在新型冠状病毒席卷全球的过去几年间取得 飞速发展1 。被赋予了快速“通行证”的全球第一款mRNA疫 苗，BioNTech和辉瑞公司开发的BNT162b2产品2 的上市，代 表全球的mRNA疫苗正式从研究阶段进入商用。尽管整个周期 缩短，但与疫苗的安全性和有效性相关的CQAs依然经过了监 管部门的表征和监控。与此同时，其他寡核苷酸生物制品，如 质粒DNA（plasmid DNA，pDNA）、反义寡核苷酸（antisense oligonucleotide，ASO）3 、小干扰RNA（small interfering  RNA，siRNA）4 等寡核苷酸药物的表征也获得了丰富经验。其 中，基于高分辨质谱的液相色谱-高分辨质谱联用（LC-MS） 技术也成为寡核苷酸深入表征的重要手段，应用于寡核苷酸药 物从发现、开发到质量控制（Quality Control，QC）的各个阶段，充分地遵循和诠释了“质量源于设计”的概念，通过加强 过程设计和控制，提高开发和生产的效率。 多质量属性监测代表了一种优化的分析解决方案5 ，专注于深入 表征生物制品的关键质量属性，有望以单个LC-MS 实验来取代 多个传统的 QC 放行和稳定性测试方法（包括传统电泳和色谱 方法）6 。 本文开发了一整套从前端Orbitrap Exploris 120质谱仪到后端Orbitrap Exploris MX质量分析器的分析流程，由合规的Chromeleon软件控制，成功用于修饰核酸样品的多质量属性监测。