灰黄霉素的有关+含测分析 参考《中国药典》(2020版)

《中国药典》中灰黄霉素有关物质项下系统适用性要求：灵敏度溶液色谱图中，主成分色谱峰峰高的信噪比应大于10。含量测定项下系统适用性要求：系统适用性溶液色谱图中，去氢灰黄霉素峰（相对保留时间约为1.1）与灰黄霉素峰间的分离度应符合要求。

灰黄霉素结构式如下：

灰黄霉素

C17H17ClO6

CAS号:126-07-8

图1  灵敏度溶液分析结果谱图

对照品溶液结果中，灰黄霉素主峰保留时间为12.245min，理论塔板数为22501，不对称因子1.06，峰形良好。供试品溶液结果中，灰黄霉素峰和相对保留时间为1.07的色谱峰之间的分离度为2.22，分离度良好。

图2  供试品溶液与对照品结果谱图

表1  供试品溶液结果数据

【色谱条件】

色谱柱：CAPCELL PAK C18 MGII S5; 4.6×250

流动相：A，50 mmol/L 磷酸二氢钾溶液/乙腈/甲醇(57/38/5)(pH=3.7)；B，50 mmol/L 磷酸二氢钾溶液/乙腈/甲醇(28/68/8)(pH=3.7)

B% 0%(0min)-0%(14min)-100%(24min)-100%(34min)-0%(39min)-0%(49min)

流速：1.0 mL/min

温度：35 °C

检测：PDA 254 nm

对照品溶液：5 μg/mL(溶剂为流动相A)

供试品溶液：0.5 mg/mL(溶剂为流动相A)

灵敏度溶液：0.25 μg/mL(溶剂为流动相A)

进样量：10 µL

含量测定

仍然使用MGII柱，按照含量测定项下要求进样系统适用性溶液与供试品溶液，分析结果如图3、图4、表2、表3所示。

系统适用性溶液结果谱图中，灰黄霉素峰和相对保留时间为1.07的色谱峰之间的分离度为2.23，符合药典要求。

图3  系统适用性溶液结果谱图

表2  系统适用性溶液结果数据

图4  供试品溶液含量测定结果谱图

表3  供试品溶液含量测定结果数据

【色谱条件】

色谱柱：CAPCELL PAK C18 MGII S5;4.6×250

流动相：50 mmol/L 磷酸二氢钾溶液/乙腈/甲醇(57/38/5)(pH=3.7)

流速：1.0 mL/min

柱温：35 °C

检测：PDA 254 nm

系统适用性溶液：0.5 mg/mL(溶剂为流动相)

供试品溶液：0.1 mg/mL(溶剂为流动相)

进样量：10 μL

综上所述，使用CAPCELL PAK C18 MGII色谱柱，照药典有关物质与含量测定项下规定条件分析灰黄霉素，均可得到符合药典要求的结果。

同时，我们也考察了DAISOPAK SP-100-5-ODS-P在相同色谱柱规格、流动相条件和待测物的情况下的分析结果，对比如下：