《中国药典》2020年版第一增补本中对盐酸萘甲唑啉有关物质测定做了修订，修订后采用高效液相色谱法，使用辛基硅烷键合硅胶色谱柱进行测定，推荐了具体的色谱柱品牌规格型号，由此可见该项目在方法建立实验时对色谱柱的选择性要求较高，并明确要求系统适用性溶液色谱图中，萘甲唑啉与杂质Ⅰ峰之间的分离度应不小于2.0。

针对盐酸萘甲唑啉测定要求，本次选用纳谱分析ChromCore AR C8, 5μm, 4.6×250mm色谱柱对盐酸萘甲唑啉进行分离与测试，色谱检测条件与测定图谱如下：

实验谱图

实验结论

选用纳谱分析ChromCore AR C8色谱柱对盐酸萘甲唑啉进行分离与检测，萘甲唑啉与杂质Ⅰ的分离度为2.8，满足药典要求，可用于盐酸萘甲唑啉有关物质测定，为该药物的质量保证提供检测依据。

实验小结

1、盐酸萘甲唑啉和杂质I的结构式均带有碱性官能团-NH2和-NH-，故色谱条件在选择时使用了酸性条件下采用离子对试剂辛烷磺酸钠，使物质的保留和峰形都更好，流动相pH值也在大部分C8色谱柱的耐受范围内；

2、流动相中有离子对试剂，平衡时间较长，可以采取小流速较长时间，或者大流速短时间的平衡方式，加快系统的平衡；

3、由于使用了离子对试剂对键合相的改性较强，因此建议专柱专用；

4、色谱柱使用前用10%的乙腈水将系统和色谱柱中的高比例有机相溶剂置换后再更换成含离子对试剂的流动相，避免析出；

5、色谱柱使用完后先使用10%的乙腈水冲洗10倍柱体积，再使用90%的乙腈水冲洗10倍柱体积保存色谱柱；

6、如果色谱柱出现异常，除掉盐后可以使用50%的甲醇水溶液0.2 mL/min的流速冲洗50-60倍柱体积，90%的甲醇水冲洗30倍柱体积再使用。