是时候聊聊氨基柱那些事儿了~案例分享&氨基柱使用维护宝典
是时候聊聊
氨基柱那些事儿了~
案例分享&氨基柱使用维护宝典
HILIC模式是亲水性相互作用色谱,为键合极性官能团如氨基、酰胺基、二元醇基等,综合了液液分配、离子交换、氢键作用力。旨在通过改变分离选择性,增强极性化合物或减弱疏水性化合物的保留。
本文我们以三个应用案例来聊聊HILIC模式中的氨基柱!文末还有氨基柱使用维护宝典,可以下滑查看哦~
在极性化合物的液相分析中,常规反相色谱柱存在保留不佳的问题,此时可以尝试HILIC色谱柱。
首先,我们以尿囊素为例。尿囊素在医药中有润肤、消炎等功效,其结构中有多个亲水氨基基团。我们参照《硫酸锌尿囊素滴眼液》中尿囊素测定方法,使用技尔InertSustain NH2氨基柱进行分析。InertSustain NH2基体为新型ES硅胶,惰性高,峰形优,该项目结果中尿囊素保留时间3.7min且与羟苯乙酯峰分离度为3.3,可以满足标准中的检测需求。
尿囊素
色谱条件
色谱柱:InertSustain NH2(5μm,250×4.6mm I.D. Cat.No:5020-16628)
保护柱:GL Cart InertSustain NH2(5μm,5×4.6mm I.D. Cat.No:5020-16723)
流动相:甲醇/水=60/40
流速:1mL/min
柱温:30℃
检测器:UV 224nm
进样量:20μL
另外,在《中华人民共和国药典》第一部中有枸杞子中甜菜碱含量测定标准。甜菜碱为季铵型生物碱,极性强,标准为使用氨基键合硅胶填充剂的液相色谱法。但大多市售氨基柱结果中易拖尾,且枸杞子药材基质复杂,供试品中杂质存在干扰,分离不理想。该项目使用技尔Inertsil NH2氨基柱,结果中峰形、分离良好,可以满足枸杞子中甜菜碱含量测定的检测需求。
甜菜碱
Inertsil NH2与某市售氨基柱
对该项目的分析情况对比
与某市售氨基柱对该
项目的分析情况对比
Inertsil NH2峰形
分离均良好
色谱条件
色谱柱:Inertsil NH2 (250×4.6mm,5μm I.D. P/N:5020-05546)
保护柱:GL Cart Inertsil NH2 (5×4.6mm,5μm I.D. P/N:5020-20220)
流动相:乙腈/水=85/15
流速:1mL/min
柱温:40℃
检测波长:UV 195nm
进样量:10μL
以及在制药和食品行业中有糖类的分析项目,糖类水溶性较强,常用氨基柱来进行分析。我司两款键合氨丙基的氨基柱,分析果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖,结果均可达到分离目的。对比来说,Inertsil NH2对糖的保留更强,InertSustain NH2响应更高,各位老师可按需选择。
果糖
葡萄糖
蔗糖
麦芽糖
色谱条件
尺寸:5μm,250×4.6mm I.D.
流动相:乙腈/水=75/25
流速:1.0mL/min
柱温:40℃
检测器:RI
样品:1.果糖 2.葡萄糖 3.蔗糖 4.麦芽糖
氨基柱使用维护宝典
我们收到了很多老师对市面上氨基柱寿命不佳的疑问,希望寻求更好的使用维护方法,来延长色谱柱的寿命。
首先氨基柱在水相比例过多的情况下是很不稳定的,对柱子是有损害的。同时氨基柱也不宜在强酸的环境下使用。
使用氨基柱时需要注意以下事项:
① 要特别注意控制流动相pH值范围,pH值越低越有发生水解的危险,最好控制在pH3.0-7.0;
② 色谱柱的冲洗:流动相若含有缓冲盐,则在实验分析完毕之后,需要用不少于缓冲盐比例的纯水/乙腈冲洗至少10倍柱容量,但要注意纯水比例不宜超过50%。再用100%乙腈冲洗至少10倍柱容量,并保存在100%乙腈中;
③ 色谱柱的保存:如短期内不用,可用乙腈保存;长期不用时最好用异丙醇充分置换,最后用正己烷保存。
小编推荐:我们推荐GL Sciences氨基柱InertSustain NH2和Inertsil NH2,拥有更高的惰性和耐久。其中InertSustain NH2可提供试用,欢迎有项目需求的老师试用!
技尔氨基柱产品信息(部分规格):
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关于技尔上海
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