1、原理及适用范围

        大肠菌群是评价食品卫生质量的重要指标之一，目前已被广泛应用于食品卫生检验工作中。大肠菌群多存在于温血动物粪便、人类经常活动的场所以及有粪便污染的地方，大肠菌群数的高低，表明了食品及食品生产过程中受污染的程度。大肠菌群测试片（Filmplate^TM Enumeration of Coliform BE211）含有选择性培养基、大肠菌群特异性半乳糖苷酶的显色指示剂和高分子吸水凝胶，运用微生物测试片专有技术，做成一次性快速检验产品。本产品适合于食品、饮用水及原料中大肠菌群的计数，也可用于食品加工设备表面的卫生检测。执行标准：食品安全国家标准 食品微生物学检验大肠菌群计数（GB/T 4789.3—2010）。



2、操作方法

        2.1、样品处理：取样品25mL（g）放入含有225mL灭菌磷酸缓冲液稀释液（或生理盐水）的取样罐或均质杯内，制成1:10的样品匀液，用1mL灭菌吸管吸取1:10样品匀液1mL，注入含有9mL稀释液的试管内，振摇后成为1:100的样品匀液。

        2.2、接种：一般食品选2～3个适宜的稀释度进行检测，含菌量少的液体样品（如饮用纯水和矿泉水等）可直接吸取原液进行检测。将大肠菌群测试片置于平坦实验台面，揭开上层膜，用无菌吸管吸取1mL样品匀液慢慢均匀地滴加到纸片上，然后将上层膜缓慢盖下，静置10s左右使培养基凝固。每个稀释度接种两片。同时做一片空白阴性对照。 

        2.3、培养：将测试片叠在一起放回原自封袋中，并封口，透明面朝上水平置于恒温培养箱内，堆叠片数不超过12片。培养温度为36℃±1℃，培养15～24h。



3、计数原则及报告方式 

        3.1、培养后纸片上的蓝色菌落为大肠菌群菌落，选择菌落数在15CFU～150CFU之间的纸片进行计数。

        3.2、若两个稀释度的菌落数均在15CFU～150CFU之间，则取其平均菌落数乘以稀释倍数报告之，即为每毫升（或每克）样品中的大肠菌群菌落数。

        3.3、如果所有稀释度的测试片上的菌落数都小于15CFU，则计数稀释度最低的测试片上的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。

        3.4、如果所有稀释度的测试片上均无菌落生长，则以小于1乘以最低稀释倍数报告之。

        3.5、如果最高稀释度的测试片上的菌落数大于150CFU个时，计数最高稀释度的测试片上的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。计数菌落数大于150CFU的测试片时，也可计数一个或两个具有代表性的方格内的菌落数，换算成单个方格内的菌落数后乘以20(纸片生长面积为20cm²)即为测试片上估算的菌落数。报告单位以CFU/mL（或CFU/g）表示。



4、附加说明

        4.1、大肠菌群测试片不但可以大大缩短检测时间，而且检测结果与传统方法很接近，符合率可达90％左右。

        4.2、样品匀液的pH值应在 6.5～7.5之间，必要时用1mol/L氢氧化钠（NaOH）或1mol/L盐酸（HCl）调pH。



5、保存条件

        本产品需存放在4℃～10℃冰箱中，保质期为一年，铝箔袋打开后,未用完的纸片要放回铝箔袋中封好，放到冰箱中，一个月内用完。在高湿度的环境中可能出现冷凝水，最好在拆封前将整包回温至室温。