1. 产品简介

　　Protein A能特异性地与抗体的Fc区结合，所以Protein A亲和介质可用于抗体(单抗和多抗)的分离纯化，经过一步亲和层析，即可从腹水、血清和培养液等样品中得到高纯度的抗体。Protein A QZT 4FF亲和介质以自制的琼脂糖凝胶为基质，以重组Protein A为配基，具有很高的物理化学稳定性，配基不易脱落，寿命长，使用方便，应用广泛。

　　2. 产品特性

　　Protein A QZT 4FF亲和介质的理化性质和产品特性如表1所示。

表1 Protein A QZT 4FF亲和介质的理化性质和产品特性

　　3. 使用方法

　　Protein A QZT 4FF广泛用于各种抗体的分离纯化。层析操作通常包括装柱、平衡、进料、淋洗、洗脱、再生等步骤。

　　平衡：用5~10CV的平衡缓冲液(20 mM PB+0.15M NaCl，pH 7.0，添加适当浓度的NaCl抑制非特异性吸附)平衡层析柱，至流出液电导和pH不变(与平衡液一致)。

　　进料：样品缓冲液应尽可能与平衡液一致。固体样品可用平衡液溶解配制;低浓度样品溶液可用平衡液透析;高浓度样品溶液可用平衡液稀释。为了避免堵塞层析柱，样品应经离心或微滤(0.45μm)处理。进料量根据介质的载量和料液中目标蛋白的含量计算。

　　淋洗：上样完毕后继续用平衡缓冲液淋洗至基线。

　　洗脱：用洗脱缓冲液(20 mM柠檬酸，pH 3.0-4.0;或0.1M甘氨酸，pH 3.0;或20 mM乙酸钠，pH 3.0-4.0;具体洗脱条件与抗体的结合强度和稳定性密切相关，效果不好时应进行洗脱缓冲液(种类和pH或添加剂)的优化)洗脱，收集流出液。洗脱后，应立刻用碱性缓冲液(如1M Tris/HCl, pH 9.0)将收集到的抗体溶液中和到抗体稳定的pH，避免抗体失活，维持抗体的生物活性。

　　再生、原位清洗：介质使用数次(5-10次，具体次数与原料的种类和来源及实验要求有关)后，需要对介质进行再生、在位清洗。

　　(1)用0.1M的乙酸或0.1M的乙酸/20%乙醇淋洗柱子3-5CV，然后用缓冲液洗到中性即可重复使用;

　　(2)也可用0.05M NaOH+1M NaCl或6M盐酸胍淋洗柱子3-5CV，并用3~10 CV的纯水冲洗，然后用缓冲液洗到中性即可重复使用。

　　其它注意事项：在装柱、使用和保存柱子的时候，要避免柱子流干，气泡进入。