恩诺沙星(Enrofloxacin)ELISA检测试剂盒是应用 ELISA 技术研发的新一代药物残留检测 产品，与仪器分析技术相比具有快速、简便和灵敏度高等优点，  能减少工作强度。

1、将所需试剂从冷藏环境中取出，置于室温（20～25℃）平 衡30min 以上，注意每种液体试剂使用前均须摇匀。

2、取出需要数量的微孔板，将不用的微孔板放进原锡箔袋中 并且与提供的干燥剂一起重新密封，保存于2～8℃。切勿 冷冻。 

3、洗涤液【配液 1】在使用前也需回温。 

4、编号：将样品和标准品对应微孔按序编号，每个样品和标 准品做 2 孔平行，并记录标准孔和样品孔所在的位置。

5、加标准品/样本：加标准品或样本50μL/孔到对应的微孔中， 然后加入酶标物50μL/孔，最后加入抗试剂50μL/孔，轻轻 振荡混匀，用盖板膜盖板后置于 25℃避光环境中反应30min。 

6、洗板：小心揭开盖板膜，将孔内液体甩干，用洗涤液【配 液 1】250μL/孔，充分洗涤4~5次，每次间隔10s，用吸水 纸拍干（拍干后若有气泡可用未使用过的枪头戳破）。 

7、显色：加入底物液A液50μL/孔，再加底物液B液50μL/孔， 轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置于 25℃避光环境中反应 15min。 

8、测定：加入终止液50μL/孔，轻轻振荡混匀，设定酶标仪于 450nm 处（建议用双波长 450/630nm 检测，请在5min 内读 完数据），测定每孔OD值。(若无酶标仪，则不加终止液用目测法可进行判定)。