概述
用途
免疫亲和柱可特异性选择吸附样品液中的VB12，从而对基质复杂的样品中的VB12起到针对性的净化作用，过柱净化后的样品可直接用于HPLC或LC-MS分析。亲和柱与HPLC或LC-MS配合使用可达到快速测定的目的，以改善信噪比，可提高检测方法的准确度。
概述
VB12，别名氰钴胺素、抗恶性贫血维生素等，是一种重要的B族维生素，摄取不足可能引起恶性贫血、精神不振等疾病。
原理
测定的基础是抗原与抗体反应，抗体连接在柱体内，样品经过提取、离心、过滤，缓慢的通过VB12免疫亲和柱，在免疫亲和柱内VB12与抗体结合，之后洗涤免疫亲和柱除去没有被结合的其他杂质。用甲醇洗脱VB12，经氮气吹干复溶后注入到分析仪器中检测。
注意事项
1.使用前，免疫亲和柱需回至室温（22～25°C）。
2.亲和柱2～8°C储存，不得冻存。-
3.不要使用过了有效日期的免疫亲和柱。
4.取样量：根据需要可以适当增加或减少取样量，注意提取液量要相应改变。
5.柱容量：1000ng，当样本中待检VB12的含量除以稀释倍数高于柱容量时，需要适当降低上样液的体积，重新检测。
6.pH：亲和柱的上样溶液pH需在6～8之间，若偏离此范围需要用盐酸或氢氧化钠调节pH。
7.在重力作用下过柱或用气控操作架控制流速为1.5-2mL/min。
8.上机检测时的溶剂与流动相一致可消除溶剂效应的影响。
9.氰化钾有毒，操作时要穿防护服、戴长筒胶皮手套、护目镜、口罩和帽子。氰化钾遇酸会释放剧毒气体氢氰酸，反应完的废液中可加入次氯酸钠溶液，处理后再排放；所有接触过的器皿、手套建议用4%次氯酸钠浸泡处理。此溶液中可以适当加些氢氧化钠，保证溶液的碱性环境，24小时后，用氰基检测试纸检查。
