中文名:琼脂糖凝胶6B
英文名:Sepharose 6B
货号:B579208
存储温度:2-8°C储存,避免反复冻融
产品介绍:
琼脂糖凝胶6B是用6%浓度琼脂糖制备成的球型颗粒,为乳白色球状凝胶,无嗅、无味、无肉眼可见杂质,可作为凝胶层析介质使用,用于分子量差异大、对分辨率要求不高的样品的凝胶层析纯化。具有非特异性吸附低,回收率高,可多次重复使用等特点
基础参数
树脂类型 | 4B Gel Filtration Resin | 6B Gel Filtration Resin |
分离范围 | 60-20000kDa | 10-4000kDa |
最大流速 | 15cm/h |
推荐流速 | 10cm/h |
PH 稳定值 | 3-10 |
耐反压 | 0.02MPa |
耐温性 | 2-30℃ |
应用 | 分离不同分子量的高分子物质,或制备其他功能填料的基础介质。 |
填料粒径 | 60-180μm |
储存 | 20%乙醇,2-25℃ |
运输 | 2-30℃,常压、避光 |
保质期 | 5年 |
使用方法
1.装柱
装柱前建议将20%乙醇抽滤去除,置换成去离子水。将75%介质和25%去离子水混匀,真空负压脱气,进行匀浆装柱。不要使用粘性试剂装柱。装柱完成后,可以用粘性缓冲液低流速平衡层析柱。(注意事项:在装柱、使用和保存柱子的时候,要避免柱子流干)
2.缓冲液准备
所用水和缓冲液在使用之前建议用0.22μm或0.45μm滤膜过滤。建议使用离子强度为0.15或以上的缓冲液,以避免样品和基质之间的任何不必要的离子相互作用。
3.样品纯化
平衡: 上样之前,用3-5CV (柱体积)的平衡缓冲液(如20 mM PB+0.15 M NaCl, pH7.0,具体的缓冲液体系应根据目标蛋白的稳定性和等电点来选择)平衡层析柱,至流出液电导和pH不变(与平衡液一致)。
上样: 样品缓冲液应尽可能与平衡液一致。推荐上样体积为柱体积的2-5%,为了避免堵塞层析柱,样品应经离心或微滤(0.45μm) 处理。上样量根据介质的载量和料液中目标蛋白的含量计算。
淋洗: 上样完毕后继续用平衡液淋洗至基线。
洗脱: 用洗脱缓冲液(与平衡缓冲液一致)洗脱,收集各个洗脱峰。
4.清洗
4.1 去除非特异性结合蛋白和脂蛋白
用0.5M NaOH清洗一个柱体积, 去离子水或缓冲液平衡至中性。
4.2 去除一些沉淀或变性物质,建议使用下面的方法:
用4倍柱体积的1.0-2.0M NaOH溶液对介质进行清洗,然后立即用2-3倍柱体积的水清洗。
4.3 去除一些强结合的疏水蛋白
用4-10倍柱体积的70%乙醇或30%异丙醇清洗(使用有机溶剂要梯度清洗,避免起泡)或者用含去垢剂的酸或中性溶液。比如,用1M醋酸溶液含0.5%非离子型去垢剂,随后用70%乙醇冲洗5个柱体积洗去残留去垢剂。
5.除菌
除菌可以减少微生物对凝胶的污染。
用1.0-2.0 M NaOH清洗凝胶30-60 min,再用3-5倍柱体积的无菌缓冲液重新平衡。
6.保存
4-30°C下20%乙醇中保存(4°C下有利于长期保存) ;层析柱中的介质可用20%的乙醇冲洗后保存于4-30°C。
用途
超高刚性
超高刚性琼脂糖基球,耐压骨架支持高流速、大规模的工业化生产
动态载量高
流速下依旧可以保持超高的动态结合能力和特异性吸附效率
产品种类丰富
提供研发及生产阶段的完整解决方案
注意事项
1. 本产品仅限科学研究使用,不得用于临床诊断和治疗等领域。
2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
技术指标
| 产品名称 | 琼脂糖凝胶6B | | 性状 | 白色微球,无嗅,无味 | | 凝胶类型 | 凝胶过滤填料,凝胶层析介质 | | 结构成分 | 6%琼脂糖凝胶 | | 粒径 | 45-165μm | | 适宜PH值 | 3-13(长时间),2-14(短时间) | | 操作温度 | 4-40℃ | | 球蛋白分离范围 | 10000-4×106 | | 保存条件 | 4-25℃ |
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