中文名:RNAstore样本保存液
英文名:RNAstore Sample Preservation Solution
纯度:BioReagent, 即用型, 无RNA酶, 无菌
货号:R665499
存储温度:室温
产品介绍:
本产品是一种液态的、无毒的组织保存试剂,它能迅速渗入组织保护 RNA。通过高效抑制 RNase 活性从而保护非冷冻细胞 RNA 于原位,使其更适合于组织基因表达谱的分析。该试剂保护后的样本可长期保存,即使是多次反复冻融 RNA也不会降解。经保护的 RNA在 37℃ 下可保存 1 天,18-25℃下可保存 7 天,2-8℃下可保存 4 周,并且可以在无干冰或液氮条件 下操作、储藏及运输样本。该试剂保护后的样本可在-20℃或-80℃条件下长期保存。经该产 品保护的组织可用于所有关于 RNA 的后续实验,包括总 RNA 的提取,microRNA 的提取, mRNA 的提取等。
样本保存步骤
一、保存新鲜组织样品
1. 迅速将所取新鲜组织剪切成厚度小于 0.5 cm,并放入预先装有 RNAstore Reagent 的 RNase-Free 收集管中 (每 100 mg 组织需 1 ml RNAstore Reagent)。
2. 收集管保存于适当条件下,经保护的 RNA 在 37℃下可保存 1 天,18-25℃下可保存 7 天, 2-8℃下可保存 4 周,并且可以在无干冰或液氮条件下操作、储藏及运输样本。
3. RNA 提取:取出保存的组织样本,-20℃或者-80℃保存的样品需先在室温下融化。
4. 立即开始组织总 RNA 提取。
二、保存培养细胞,悬浮细胞和细菌
1. 样本处理:
1.1 对于组织培养细胞样本:先沉淀细胞,用PBS洗一次,再用少量的PBS悬浮细胞, 然后加2倍体积的RNAstore Reagent保存。后续RNA的提取可以采用直接离心去除 RNAstore Reagent后进行RNA提取,也可以不用去除RNAstore Reagent直接加入RNA 提取裂解液进行直接提取。
a. 离心法:由于RNAstore Reagent的介质浓度比典型的细胞培养介质的浓度高,因此 用通常沉淀活细胞的离心力无法沉淀RNAstore Reagent中的细胞。离心沉淀细胞,去除 RNAstore Reagent。 (HeLa细胞大约需要3000×g,但其他细胞可能不能容忍这个速度, 或者他们需要更大的离心力。
b. 直接提取法:通过向细胞混合物中加入10倍体积的RNA提取试剂来完成。
1.2 对于细菌样本:先离心收集1.5 ml过夜培养的菌体,用PBS洗一次,再用30 μl的 PBS悬浮细胞,加入60 μl RNAstore Reagent保存,后续RNA的提取参照细菌总RNA提 取步骤。 2. 收集管保存于适当条件下2-8℃下可保存4周,并且可以在无干冰或液氮条件下操作、储 藏及运输样本。该试剂保护后的样本可在-20℃或-80℃条件下长期保存。如果存放在-20℃ 或-80℃,需先将样品在4℃放置过夜,并离心倒弃保护液后再转移到-20℃或-80℃。
3. RNA提取:取出保存的细胞或细菌样本,-20℃或者-80℃保存的样品需先在室温下融化。4. 立即开始细菌或细胞总RNA提取。
三、保存全血中的白细胞
1. 样本处理: 先将白细胞从全血中分离出来。 注:不要将全血、血浆或血清直接保存于RNAstore,因为它们蛋白含量过高,易与 RNAstore Reagent混合后形成沉淀。
2. 用冰浴的缓冲液 (PBS) 洗涤一次,并将白细胞悬浮在少量缓冲液 (PBS) 中。
3. 加入5-10倍体积的RNAstore Reagent,混匀。
4. 收集管保存于适当条件下,2-8℃下可保存4周,并且可以在无干冰或液氮条件下操作、储藏及运输样本。如果存放在-20℃或-80℃,需先将样品在4℃放置过夜,并离心倒弃保 护液后再转移到-20℃或-80℃。 5. RNA提取:取出保存的组织样本,-20℃或者-80℃保存的样品需先在室温下融化。立即 开始RNA提取或进行其他处理。
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