中文名:柱式法病毒DNA/RNA提取试剂盒
英文名:Viral DNA/RNA Kit V2
货号:V666028
存储温度:室温
产品介绍:
| V666028 | Component | 50 T | Storage | | V666028A | Buffer RLC | 30 mL | RT | | V666028B | Buffer PGWT | 30 mL | RT | | V666028C | Buffer GWT2 | 30 mL | RT | | V666028D | Proteinase K | 1.25 mL | RT | | V666028E | RNase-Free Water | 10 mL | RT | | V666028F | Spin Columns DM with Collection Tubes | 50 EA | RT | | V666028G | RNase-Free Centrifuge Tubes (1.5 mL) | 50 EA | RT |
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产品简介
本试剂盒适用于从全血、组织匀浆液、拭子,以及血清、血浆等无细胞体液中简 单、快速、高效地分离纯化DNA/RNA。独特的缓冲体系使裂解液中的病毒核酸高效特 异地结合在硅胶质离心吸附柱上,获得的病毒核酸纯度高,质量稳定,不含蛋白、核 酸酶和其他杂质,可适用于各种常规操作,包括PCR、荧光定量PCR等实验。
自备仪器
恒温混匀仪。
实验前准备及重要注意事项
1.在实验前,应仔细阅读本说明书。
2.Proteinase K若需长期保存,请放置于-20℃。
3.使用前请检查Buffer RLC是否出现结晶或者沉淀,如有结晶或者沉淀,请将Buffer RLC于56℃水浴重新溶解。
4.组织样本前处理:取20 mg组织样本放入1.5 mL离心管(自备)中,加入500 μL的 Buffer RLC,组织匀浆仪打碎后,12000 rpm(~13400×g)离心1分钟,取200 μL 上清为样本。
操作步骤
1.取1.5 mL离心管(自备),加入500 μL Buffer RLC,200 μL样本,20 μL Proteinase K,涡旋震荡5 s后,置于室温,1200 rpm的恒温混匀仪震荡10 min。 注:湿拭子样本,充分震荡混匀后取200 μL进行提取。干拭子样本浸泡于400 μL生理盐水中,充 分震荡混匀后静置5分钟,12,000 rpm离心1分钟后,取200 μL进行提取。
2.瞬离离心管,将步骤1所得溶液加入到已装入收集管的吸附柱(Spin Columns DM) 中。12,000 rpm(~13,400×g)离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新 放回收集管中。
3.向吸附柱中加入500 μL Buffer PGWT,12,000 rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废 液, 将吸附柱重新放回收集管中。
4.向吸附柱中加入500 μL Buffer GWT2,12,000 rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废 液, 将吸附柱重新放回收集管中。 1
5.2,000 rpm离心2分钟,倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温2分钟,晾干。
6.将吸附柱置于新的收集管(RNase-Free Centrifuge Tube)中,向吸附柱膜的中间 部位悬空加入40-100 μL RNase-Free Water,室温放置2分钟,12,000 rpm离心1 min, 收集核酸溶液。置于-80℃长期保存。
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