细胞增殖与毒性检测(CCK-8、MTT)

细胞增殖与毒性检测(CCK-8、MTT)

CCK-8检测细胞增殖（活力）：CCK-8（cell-counting kit-8）检测试剂盒是应用WST-8取代MTT被还原，WST-8是一种类似于MTT的化合物，在电子耦合试剂存在的情况下，可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的formazan。WST-8产生的formazan比XTT和MTS产生的formazan更易溶解。且WST-8相较XTT和MTS化学性状更稳定， 因此实验结果相对更加稳定。此外，WST-8相较MTT、XTT，线性范围相对宽，灵敏度更高。

当细胞增殖得越多越快，则formazan产生量越多，颜色越深；反之，当内外因造成的细胞毒性越大，则颜色越浅。对于同样的细胞，颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。应用酶标仪测定吸光值并进行统计学计算便可以获得细胞增殖（活性）相关数据。

应用：
肿瘤细胞增殖活性的检测
目的基因瞬转/稳转细胞系的细胞增殖活性研究
小分子化合物/多肽等药物筛选及功能安全性研究
中药/中间体等药物筛选及功能安全性研究
目的基因过表达的基因功能研究
目的基因RNAi干扰的基因功能研究
microRNA过表达/干扰的调控机制研究

实验原理

    CCK-8（Cell Counting kit-8）试剂中含有WST–8：化学名：2-(2-甲氧基-4-******基)-3-(4-******基)-5-(2,4-二磺酸***)-2H-四唑单钠盐]，它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪***（1-Methoxy PMS）的作用下被细胞线粒体中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲?产物（Formazan），生成的甲?物的数量与活细胞的数量成正比，可采用酶联免疫检测仪在450nm波长处测定其光吸收值，间接反映活细胞数量。

 实验流程

锐赛贴士：MTT法虽然经典，但因步骤相对较多，耗时较长，相对很多新技术其优势已无力维持，目前正逐渐淡出我们的市场服务范围；相对MTT耗时和相对多步骤，MTS与CCK-8的方法因减少了时耗和人耗，因此成本已经得到zei大程度的降低，MTS法成本zei低，而CCK-8法的稳定性和准确性可以为客户带来zei优化的实验结果。 

锐赛优势：锐赛多年来致力于为客户打造zei优化的实验方案和zei可靠的实验方法，经过多年的实验实践积累，本着对客户负责的原则，我们总是在可靠的实验基础上为客户选择zei优化的实验方法，使成本更低，并还利于客户的同时，方法的准确度和可靠性都更值得信赖。 

锐赛采用自主研发的CCK-8试剂盒，经过一系列对比试验，稳定性都优于市场上的同类品牌产品，且性价比极高。

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