细胞系基因靶向操作服务

细胞系基因靶向操作服务

基因敲除敲入技术一直是研究特定基因功能的有效工具。沐赛生物利用zei新的CRISPR/Cas系统可以有效的实现对细胞系特定基因的敲除和定点突变。

技术原理

ClusteredRegularlyInterspacedShortPalindromicRepeats（CRISPR）/Cas是细菌和古细菌不断进化而获得的免疫防御机制，其中II型CRISPR/Cas免疫系统依赖Cas9内切酶家族靶向和剪切外源DNA。CRISPR/Cas9系统通过小导向RNA(sgRNA)对切割区域进行识别，进而利用Cas9内切酶实现靶向区域的切割以产生DNA双链断裂。该系统灵活简单，可实现多个靶点的同时操作。目前我们采用DoubleNicking技术，显著降低脱靶率。

我们利用该技术，定点敲除和修饰各种细胞系中的特定基因。对打靶细胞进行药物筛选，利用CRISPR/Cas系统获得的基因敲除细胞的剔除效率会明显高于常规的利用RNAi和shRNA介导的基因敲落。

技术特色

1.可实现多个靶基因位点及多个基因的同时敲除

2.zei新Nickase酶/双gRNA技术，显著降低脱靶率

3.无种属限制，适用于各种细胞系的靶向敲除

4.服务周期短，2个月即可交付阳性细胞

服务流程及周期

靶向目标序列gRNA的设计及载体构建

目标细胞系共转染

阳性细胞株的筛选和鉴定

应用范畴

基因功能分析：在细胞水平研究基因的功能

定点突变：:建立点突变细胞，可用于药物靶点研究。

启动子功能分析：该方法建立的启动子分析系统，可有效地分析内源性启动子的强度，是一种最理想的分析系统。

威斯腾实验服务流程

威斯腾生物服务项目