LC-MS/GC-MS/ NMR代谢组

LC-MS代谢组

通过液质联用（LC-MS）方法检测生物体受扰动或刺激前后大量代谢产物的动态变化，进而阐明生物体代谢相关过程的代谢组学技术。其研究对象主要是相对分子质量1000以下的内源性小分子代谢物。

技术原理

液相色谱可以分离无挥发性和未衍生化的代谢物，因此LC-MS可以分析的化合物种类范围比GC-MC广。LC-MS最适合作为未知代谢物研究中的探索方法，或者在多种目标代谢物由于挥发性问题不能用GC-MS进行分析时采用。

实验流程

液相色谱柱

 C18反相柱              HILIC亲水柱

质谱分析模式

正离子模式              负离子模式

技术优势

相对于NMR，重复性和灵敏度更高

相比于GC-MS，分析范围更广

应用领域

表型和生理功能研究、疾病病理研究、临床诊断及治疗、药物研究、中医理论研究、食品科学与营养学研究                                           

GC-MS非靶向代谢组

代谢组学是研究生物体系（细胞、组织或生物体）受刺激或扰动后代谢组的变化的科学，是探究生物现象结果的科学。

气相色谱质谱联用（GC-MS）是较为成熟的色谱-质谱联用技术之一，由于其分辨率高、灵敏度高、重现性好，具有大量标准代谢物谱图库，且成本相对低廉等特点，适合分析相对分子质量小（500Da以内）、低极性、低沸点的代谢物。

技术流程

技术优势

技术成熟稳定，灵敏度高、动态范围宽

有标准数据库，更易定性

针对性的预处理方案，适用于多种性质的小分子检测

NMR检测 

NMR是通过外加静磁场作用核磁距不为零的原子核，核自旋能级跃迁，共振吸收某一特定频率的射频的物理过程，通过检测化学位移、峰的裂分和偶合常数、峰面积等数据进而得到代谢化合物的信息。

核磁类型

NMR有H谱核磁，C谱核磁，P谱核磁，F谱核磁，DEPT谱核磁等

核磁溶剂

NMR测试溶剂：氘代氯仿，氘代DMSO，氘代水等

应用领域

为有机化合物结构分析提供信息，配合进行化合物定性定量分析，广泛应用于有机化合物、农药、及生物大分子结构与性能研究。

主要应用于有机物分子结构解析，有机物定性定量，有机物结构验证，杂质分析。

包括：无机单晶结构解析、样品的元素组成及含量检测；

未知物定性表征，对已知物质进行验证和判别；

分子结构组成分析、特征物质和特征基团定量分析、样品基本结构判断；

无机物的定性分析、晶相分析、晶型判断、键长键角等晶胞参数的测量。

分析流程

样本前处理（包括萃取代谢物、去除蛋白）

预实验，确定最佳分析条件

样本的通量分析，获得原始谱图数据

送样要求

¹H 谱>10 mg ， ¹³C 谱>20 mg ，聚合物量需适当增加。固体，液体。可以溶解在D₂O, DMSO,氯仿等溶剂中，溶解度>1mg/mL最好。送样时注明溶剂、结构式等。