细胞转染

细胞转染

瞬时转染与稳定转染（永久转染）。

     下列图片是293T细胞转染pwxld质粒18h后荧光显微镜观察图片

样品要求及注意事项：

1低温运输：干冰运输：取对数生长期的细胞（细胞传代后细胞汇合度达到80%时），用胰蛋白酶把单层生长的细胞消化下来，低速离心1000rpm，5min；弃掉上清（胰蛋白酶及旧的培养液），加入适量配制好的冻存液，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，血球计数板计数，调节冻存液中细胞的zei终密度为5×106/ml～1×107/ml；将细胞分装入冻存管中，每管1～1.5 ml；在冻存管上标明细胞的名称、细胞代次、冻存时间及操作者；放4℃冰箱30min，-20℃30min到1h，-80℃过液，然后放入液氮罐； 

2常温运输：细胞贴壁覆盖瓶底面积达40%以上时，装满培养液，瓶口用封口膜封好，装入盒子，盒子里用泡沫或棉花塞满，让瓶子固定在盒子中。