耗材描述
MTT是一种粉末状化学试剂，全称为3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di- phenytetrazoliumromide，汉语化学名为 3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴盐，商品名：噻唑蓝 。是一种黄颜色的染料。
检测原理：MTT是一种接受氢离子的染料，可作用于活细胞线粒体中的呼吸链，在琥珀酸脱氢酶和细胞色素C的作用下 tetrazolium环开裂，生成蓝色的formazan结晶，formazan结晶的生成量仅与活细胞数目成正比（死细胞中琥珀酸脱氢酶消失，不能将MTT还原）。二甲基亚砜(DMSO )能溶解细胞中的甲瓒，用酶标仪在490nm波长处测定其光吸收值，在一定细胞数范围内，MTT结晶形成的量与细胞数成正比。根据测得的吸光度值(OD值)，来判断活细胞数量，OD值越大，细胞活性越强(如果是测药物毒性，则表示药物毒性越小)。
实验步骤
1：收集对数期细胞，调整细胞悬液浓度，每孔加入100u1，铺板使待则细胞调密度1000-10000孔，（边缘孔用无菌PBS填充）。
2：5%00：，37℃孵育，至细胞单层铺满孔底（96孔平底板），加入浓度梯度的药物，原则上，细胞贴壁后即可加药，或两小时，或半天时间，但我们常在前一天下午铺板，次日上午加药。一般5-7个梯度，每孔100u1，设3-5个复孔。建议设5个，否则难以反应真实情况
3：5%002，37℃孵育16-48小时，倒置显微镜下观察。
4：每孔加入20ulMTT溶液（5mg/m1，即0.5%MTT），继续培养4h。若药物与TT能够反应，可先离心后弃去培养液，小心用PBS冲2-3遍后，再加入含MIT的培养液。
5：终止培养，小心吸去孔内培养液。
6：每孔加入150u1二甲基亚矾，置摇床上低速振荡10min，使结晶物充分溶解。在酶联免疫检测仪0D490rm处测量各孔的吸光值。
7：分析MTT结果
含有以下细胞
Caco-2,MCF-7,HaCaT
检测原理：MTT是一种接受氢离子的染料，可作用于活细胞线粒体中的呼吸链，在琥珀酸脱氢酶和细胞色素C的作用下 tetrazolium环开裂，生成蓝色的formazan结晶，formazan结晶的生成量仅与活细胞数目成正比（死细胞中琥珀酸脱氢酶消失，不能将MTT还原）。二甲基亚砜(DMSO )能溶解细胞中的甲瓒，用酶标仪在490nm波长处测定其光吸收值，在一定细胞数范围内，MTT结晶形成的量与细胞数成正比。根据测得的吸光度值(OD值)，来判断活细胞数量，OD值越大，细胞活性越强(如果是测药物毒性，则表示药物毒性越小)。
实验步骤
1：收集对数期细胞，调整细胞悬液浓度，每孔加入100u1，铺板使待则细胞调密度1000-10000孔，（边缘孔用无菌PBS填充）。
2：5%00：，37℃孵育，至细胞单层铺满孔底（96孔平底板），加入浓度梯度的药物，原则上，细胞贴壁后即可加药，或两小时，或半天时间，但我们常在前一天下午铺板，次日上午加药。一般5-7个梯度，每孔100u1，设3-5个复孔。建议设5个，否则难以反应真实情况
3：5%002，37℃孵育16-48小时，倒置显微镜下观察。
4：每孔加入20ulMTT溶液（5mg/m1，即0.5%MTT），继续培养4h。若药物与TT能够反应，可先离心后弃去培养液，小心用PBS冲2-3遍后，再加入含MIT的培养液。
5：终止培养，小心吸去孔内培养液。
6：每孔加入150u1二甲基亚矾，置摇床上低速振荡10min，使结晶物充分溶解。在酶联免疫检测仪0D490rm处测量各孔的吸光值。
7：分析MTT结果
含有以下细胞
Caco-2,MCF-7,HaCaT
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