细胞状态好坏直接影响后期实验结果,长期统计培养中遇到的问题习惯养成,对用户及公司双方所需都有好趋势并积极意义。
国内库可用免疫类暂列上海库协和库:
-----------------淋巴细胞类
小鼠T淋巴细胞瘤细胞;Cyc-Tag(S49) 人B淋巴细胞瘤细胞;RAMOS 人B淋巴细胞瘤细胞;RAMOS(RA.1) 人急性T淋巴细胞白血病细胞;Jurkat, Clone E6-1 急性T淋巴细胞白血病细胞;TALL-104 人T淋巴细胞白血病细胞;HuT 78 小鼠淋巴细胞白血病;L1210 小鼠B淋巴细胞杂交瘤细胞;SH2 小鼠B淋巴细胞杂交瘤细胞;SH3 小鼠T淋巴细胞;Cl.Ly1+2-/9 人急性T淋巴细胞性白血病细胞;I 2.1(CRL-2572) 人急性T淋巴细胞白血病细胞;Jurkat 人急性T淋巴细胞白血病细胞;JurkatE6-1 人B淋巴细胞母细胞;NTCC721.221 小鼠T淋巴细胞;CTLL-2 [CTLL2] 小鼠B淋巴细胞;WEHI 231 EB病毒转化的绒猴淋巴细胞;B95-8 中国仓鼠X小鼠B淋巴细胞杂交瘤;MR1 [derivative of HB-11048] 人T淋巴细胞白血病细胞;6T-CEM 人T淋巴细胞白血病细胞;HuT 78 人T淋巴细胞白血病细胞;A3 人急性淋巴细胞白血病T淋巴细胞;CCRF-CEM [CCRF CEM] 人急性非B非T淋巴细胞性白血病细胞;Reh 人急性淋巴细胞白血病T淋巴细胞;CCRF-CEM [CCRF CEM] 人急性淋巴细胞白血病细胞;CEM/C1 人淋巴细胞;1301
----------------- 白血病类
人急性早幼粒白血病细胞;HL-60 人慢性髓系白血病细胞;K562 小鼠红白血病细胞;MEL 人急性单核细胞白血病细胞;THP-1 人巨细胞白血病细胞株;Mo7e 人红系白血病细胞;TF-1 人类原巨核细胞型白血病细胞;UT-7 小鼠单核巨噬细胞白血病细胞;RAW 264.7 [RAW264.7
大鼠嗜碱性粒细胞性白血病细胞;RBL-1 615小鼠T细胞性白血病瘤株;L7712 615小鼠T细胞性白血病瘤株;L7912 615小鼠网织细胞性白血病瘤株;L615 人浆细胞白血病细胞;NCI-H929 人成巨核细胞白血病细胞;MEG-01 人外周血嗜碱性白血病细胞;KU812 人T淋巴细胞白血病细胞;6T-CEM 人巨核细胞白血病细胞;Dami 人红白细胞白血病细胞;HEL 人成巨核细胞白血病细胞;MEG-01 人T淋巴细胞白血病细胞;A3 急性髓系细胞白血病细胞;KG-1 人Ph+急淋白血病细胞系;SUP-B15 人红白血病细胞;Kasumi-1 人T淋巴细胞白血病细胞;HuT 78 人急性单核细胞白血病单核细胞;AML-193 人急性淋巴细胞白血病细胞;CEM/C1 人急性淋巴母细胞性白血病细胞;MOLT-4 小鼠网织细胞性白血病细胞;L615
大鼠嗜碱性粒细胞性白血病细胞;RBL-2H3
公司来源细胞暂不在后期讨论范围内,国产血清暂不在讨论范围,培养中遇到的问题,请详细描述处理细胞手法,细节,厂家,货号。冻存步骤,复苏步骤,细胞问题描述。为及时回复用户,最好回复我司邮箱。
常见问题建议:专用培养基1640,胰酶浓度0.05(成团成片建议离心后铺板消化,短时间内再次团聚厉害的,可来信沟通我司推荐步骤,实验验证中),血清,根据自己实验室能力,用到最好。
悬浮转染:很多技术老师都认为是个难题,丁香园有老师介绍很久前的办法逆转录病毒成功率高,到目前成功案例不多,各位老师可查相关文献,目前认为上述团聚厉害也是转染关键。虽然目前有几种团聚解决办法,我们也在验证评测中,欢迎与各位老师交流细节经验。
冻存步骤:建议头天配液,第二天用。
复苏:血清建议浓度调高,冻存步骤如无问题,细胞几周后可爬出,
免疫细胞共聚焦:
通过对悬浮转染实践并统计中,我司增强细胞贴壁试剂很快时间可将细胞驯化成贴壁细胞,成像优势很大,文献有提到黏连蛋白可用在该实验中,该试剂保存要求高,实施难度高,成本高,成功率低,重复难度大。欢迎各位老师有这方面实验的,来信沟通交流。
实验验证中:JURKAT质粒转染,鼠淋巴细胞转染,这类细胞免疫保护要有老师有兴趣或有资料,我们非常有兴趣了解并多家实验室验证。实验结果共享。
该类细胞研究北京地区同行,要长期研究这类细胞,如能互信互利双方达成友好合作的实验室,试剂筛选比对统计,我司提供试用,协助用户评测并共享统计资料,筛选平稳试剂平台,或后期课题合作。经过十年生产销售,我司有些不错的细胞培养方面各种资源。
免疫血液类研究分子及蛋白方面研究实验室可来信题目标明。我们上门拜访。
国内细胞状态统计一些小建议-血清
高质量的血清:应该是细胞出现问题能解决问题,并能持续保证质量一贯性。
与很多老师意见:其他细胞都能养活,就这个细胞养不好。正好相反,建议评审条件正好相反。如能长期关注这种问题,筛选出的血清质量结果也是最可靠的,就像我们出现问题能想到的那款血清,为啥这款血清能够完成几乎所有问题解决,几十年质量一致性,批间差几乎为零。这种血清才是高质量血清。
欢迎与常年从事细胞质量要求高的实验室一起解决各种问题,目前技术、试剂、设计、方法已相对成熟。国内从从细胞建系开始的技术试验已经非常成熟了,我司目前目前跟踪统计的原代细胞建系思路设计及实验已经有几年了,真正的成熟还要做很多的工作。我司十年的基础实践统计,欢迎您的参与与提携。
20211015:我司在该类细胞转染逆转录病毒技术上有些些突破,有兴趣老师可来信注明,如有时间重复我们试剂方法实验,要求,细胞来源明确,生长顺利(描述生长状态特性,细胞图片)。进口试剂耗材,状态一定要好,给出血清图片。经签保密协议公司授权后,可共享,所用试剂全部自有研发生产。也欢迎国内转染试剂有研发团队深入合作。高通量转染我司一直在做相关技术储备。
20211101:巨噬相关培养问题(初稿已总结好,案例还不多):原代建系方面开始统计相关,有需要老师可来信注明,进口试剂耗材(国产试剂耗材用户等统计成熟了会公布)-两年培养经验-告知实验室名称(这样沟通较准确)-转染相关请注明,我们已有些技术突破,还在验证中。