酵母双杂交

项目介绍：

  酵母双杂交指将编码诱饵蛋白和靶蛋白的基因分别克隆进载体，使得目标蛋白可融合表达GAL4 DNA 结合结构域和GAL4激活结构域。以上的两种载体共转化酵母细胞。如果诱饵蛋白和靶蛋白能够相互作用，那么GAL4 DNA 结合结构域和GAL4激活结构域就会相互作用，从而激活lacZ报告基因的表达。所以可以通过转化的酵母的表型来确定诱饵蛋白和靶蛋白是否有相互作用。

服务流程：

 A、均一化酵母双杂cDNA文库
   总RNA提取、纯化→LD PCR 合成cDNA→cDNA均一化→均一化cDNA产物与线性化的AD质粒共转化于酵母感受态（真核生物同源重组修复）→所有转化液涂于40-100块15cm平板→计数文库→效价→集合所有克隆得到最终文库。

 B、普通酵母双杂cDNA文库
   总RNA提取、纯化→LD PCR 合成cDNA→cDNA产物与线性化的AD质粒共转化于酵母感受态（真核生物同源重组修复）→所有转化液涂于40-100块15cm平板→计数文库效价→集合所有克隆得到最终文库。

客户方需提供：

  4-12周。

提供结果：

  酵母文库甘油冻存管，实验报告。