新一代BLI亲和力检测 （小分子，1KDa 以下）

Gator Bio的新一代BLI亲和力检测（小分子，1KDa以下）服务针对低分子量化合物筛选与优化需求，通过探针优化、高灵敏度检测及智能算法实现超低分子量互作分析。以下是服务的技术细节与差异化优势：

‌一、技术平台创新‌

1. ‌探针与传感器设计‌

• ‌短链链霉亲和素（SSA）探针‌：缩短生物素结合臂长度（<5 nm），降低小分子空间位阻，检测灵敏度提升至0.1 µg/mL（200 Da小分子）‌；

• ‌V-Groove光学降噪技术‌：基线波动≤0.003 nm，支持弱结合信号捕捉（KD≥10^-4 M）‌。

2. ‌实验条件优化‌

• ‌震荡增强结合‌：采用涡旋混合模式（500-1,200 rpm），加速低分子量化合物（如激酶抑制剂）与靶蛋白结合‌；

• ‌温度梯度控制‌：15-40℃精准控温（±0.1℃），适配热敏感靶标（如GPCR）的活性构象分析‌。

‌二、小分子检测核心优势‌

1. ‌超高灵敏度检测‌

• 检测限低至0.01 nM（1KDa以下化合物），支持纳升级样本量（单次检测仅需5 µL）‌；

• 可解析弱结合动力学（KD 10^-3-10^-6 M），适用于片段化合物库初筛‌。

2. ‌竞争性结合分析‌

• ‌间接检测模式‌：预孵育生物素化靶蛋白与先导化合物，检测小分子库竞争性抑制率（IC50计算）‌；

• ‌多参数拟合‌：支持1:1结合、协同抑制及多价结合模型，数据拟合R²≥0.98‌。

3. ‌探针再生与成本控制‌

• Flex SSA探针可重复使用15次以上，单次检测成本降低至传统SPR方法的30%‌；

• 智能再生程序（0.1% SDS + 50 mM甘氨酸缓冲液）保障探针活性稳定性（CV≤8%）‌。

‌三、服务流程与样本要求‌

‌1. 样本准备标准‌

• ‌纯度要求‌：HPLC验证纯度≥90%，避免含氨基或硫醇基团干扰‌；

• ‌溶解性‌：推荐DMSO终浓度≤1%（或水溶性缓冲液pH 6.5-7.5）‌；

• ‌浓度范围‌：

• 小分子化合物：1-100 µM（结合相检测）‌；

• 生物素化靶蛋白：≥0.5 µg/mL（SSA探针固定）‌。

‌2. 实验设计与交付‌

• ‌梯度稀释方案‌：非线性稀释覆盖3个数量级（如1:2、1:3序列），确保动态范围完整性‌；

• ‌数据报告‌：

• 原始结合曲线（响应值 vs. 时间）及动力学拟合图谱‌；

• 完整分析报告（含Ka、Kd、KD、IC50值及QC质控文件）‌。

‌四、典型应用场景‌

1. ‌抗肿瘤药物筛选‌

• 检测小分子抑制剂与激酶靶标（如EGFR、ALK）结合动力学，筛选高选择性候选分子（KD≤100 nM）‌；

2. ‌PROTAC分子优化‌

• 分析E3连接酶配体与靶蛋白结合力，优化三元复合物形成效率（解离速率koff≤10^-4 s^-1）‌；

3. ‌天然产物活性验证‌

• 中药单体（如紫杉醇类似物）与微管蛋白结合活性检测，支持构效关系研究‌。

‌五、服务响应与合规性‌

• ‌快速周期‌：标准检测1周

• ‌数据合规‌：通过FDA GLP认证，支持IND申报的亲和力数据提交‌。

Gator Bio的BLI小分子检测服务已成功应用于50+创新药项目，累计完成超2,000次低分子量化合物检测，数据复现率≥95%‌。

注：请按附件要求填写样本信息表，由小鳄生物进行技术评估。

Gator Bio依托自主研发的Gator®系列生物分子相互作用分析系统‌，提供基于生物膜层干涉技术（BLI）的高精度非标记亲和力检测服务。该服务采用无需生物素标记的实时动态检测方案，可精准解析蛋白等生物分子间的结合/解离动力学参数（包括Ka、Kd、KD值）‌，具备以下核心优势：

Gator生物分子相互作用仪 (BLI)

实验步骤和传感曲线图

• ‌超高灵敏度‌：专利V-Groove光学探针技术‌结合自动调平系统，检测限低至0.025 µg/mL‌，可捕捉弱结合相互作用；

• ‌复杂样本兼容性‌：通过自适应温控模块（4℃-40℃）‌3和可调震荡参数设计，支持血清、细胞裂解液等复杂基质样本的直接分析；

• ‌高通量自动化‌：采用384孔板同步检测系统‌，配合智能分析软件，单日可完成超过200组样本的标准化检测；

• ‌数据可靠性‌：通过ISO认证的质量控制体系，提供原始结合曲线、拟合分析图谱及完整实验报告。

该服务已广泛应用于抗体药物表征、靶点筛选及生物标志物验证领域，为生物制药企业及科研机构提供符合GLP标准的全流程解决方案‌。

一、技术平台与原理‌

‌生物膜干涉（Biolayer lnterferometry，BLI）技术是一种非标记检测方法，通过测量光纤生物传感器表面反射光的干涉图谱来实时检测生物分子间相互作用。Gator Bio光纤生物传感器是先将直径1mm的玻璃光纤的末端镀上专利光学层，再继续镀上特定的化学层，比较光纤生物传感器表面化学层结合生物分子后反射光的干涉图，实时监测由于生物分子积累引起的干涉变化，即可高灵敏地分析和计算目标蛋白质之间的结合和解离速率。结合信号与结合分子的大小和浓度成正相关。

BLI技术优势

Gator Bio创始人2001年正式提出BLI技术。

BLI技术于2021年，作为非标记检测方法被列入《美国药典》，用于检测分子相互作用的方法之一，同时

也被收入了药典有关抗体Fc介导的效应功能活性评价方法的章节。

BLI技术在2024年2月，被国家药吊监督管理局药品审评中心（CDE）列入《抗体偶联药物药学研究与评价技术指导原则》中，作为规范和指导抗体偶联药物（ADC）产品研发与上市申报中检测结合活性的方法之一。

Gator基于BLI技术用于检测生物分子互作优势：

• 样品及缓冲液无需脱气处理，可直接检测粗样

• 检测过程样品消耗很少，可以回收利用

• 多样的探针选择，可根据实验需求定制

• 无流路系统，无堵塞风险，仪器免维护

• 检测和分析一体化软件，操作简单

• 全面的互作信息：定量、动力学、亲和力、表位分组......

Gator检测系统

Gator系统由分析仪器、光学探针、数据采集和分析一体化软件组成。基于新一代生物膜干涉技术（BLI），通过采集、分析光纤生物传感器表面反射干涉光谱的信号变化来实时检测生物分子间的相互作用。从而得到名种生物反应参数，例如亲和力常数、蛋白浓度、表位分组等。具有使用简便、多功能、应用广泛和高通量等特点，可应用于生物药研发、生产以及生命科学研究等种领域。

Gator系统应用范围

Gator系统基于新一代生物膜干涉技术（BLI），较传统BLI产品具有更高的灵敏度和更强大的性能，可检测小到150 Da的小分子、核酸、多肽、蛋白，大到脂质体、病毒等生物分子。可被广泛应用于药物靶点筛选、抗体研发各阶段、分子递送系统、基因治疗AAV衣壳病毒载体表征等领域；可进行抗体滴度测定、解离常数排序、亲和力常数测定、表位分组、AAV衣壳滴度和空壳率检测等应用，满足多种生物分子的检测需求。

‌设备配置‌：

‌Gator® Pro‌：32通道并行检测，单次运行可分析1,152个样本，支持高通量AAV病毒载体分析；

‌Gator® Pivot‌：16通道并行检测，配备温度控制（15℃-40℃）和防蒸发模块，适用于热不稳定蛋白分析；

‌Gator® Plus‌：优化基线稳定性，可检测pM级亲和力参数，兼容96/384孔板。