Gator Bio新一代BLI定量检测（Protein/AAV衣壳滴度）

Gator Bio新一代BLI定量检测（Protein/AAV衣壳滴度）技术服务说明

技术优势与核心创新

1. ‌非标记实时检测技术‌

• 基于生物膜干涉（BLI）原理，无需荧光或放射性标记，直接通过光学干涉光谱监测分子结合/解离过程，保留样本天然活性，适用于粗提液或复杂基质样本分析‌。

• 支持实时获取结合速率（‌kon‌）、解离速率（‌koff‌）及亲和力常数（‌KD‌），检测灵敏度达皮摩尔级别，动态范围覆盖10^8–10^12 vg/mL（适用于AAV滴度检测）‌。

2. ‌高通量与自动化设计‌

• Gator® Pivot系统配备16通道并行检测，支持2块96/384孔板同时运行，单次实验可处理816个样本，显著提升基因治疗药物的大规模质控效率‌。

• 集成防挥发装置和降温系统，确保高温敏感样本（如病毒衣壳蛋白）的稳定性，减少实验偏差‌。

3. ‌低成本与灵活性‌

• 探针可重复使用10次以上（如Protein A/G、AAVX探针），结合免流路设计，降低耗材和维护成本（相比传统SPR成本降低50%）‌。

• 支持多样本类型（血清、细胞上清、纯化病毒液）直接检测，无需复杂纯化步骤，适配工业级药物开发需求‌。

样本要求与处理规范

1. ‌样本类型与预处理‌

• ‌适用样本‌：AAV纯化液（滴度≥1×10^11 vg/mL）、衣壳蛋白粗提液（纯度≥80%）、细胞培养上清（需离心12,000×g去除颗粒物）‌。

• ‌禁忌样本‌：含高浓度去污剂（如SDS＞0.05%）、强酸/强碱溶液（pH<5.0或>8.5）、浑浊悬液或未离心的细胞裂解液‌。

2. ‌体积与浓度要求‌

• 最低检测体积为40μl（推荐100μl），AAV样本需稀释至1×10^10–1×10^12 vg/mL以匹配仪器线性检测范围‌。

• 冻存样本需分装后-80℃保存，避免反复冻融（≤3次），运输需干冰或液氮保温并标注病毒血清型、宿主细胞来源等关键信息‌。

3. ‌缓冲液兼容性‌

• 支持常见缓冲液（如PBS、Tris-HCl），但需避免含高浓度甘油（>10%）或表面活性剂（如Tween-20＞0.1%）的样本，以防干扰检测信号‌。

典型应用场景与数据交付

1. ‌核心应用场景‌

• ‌基因治疗研发‌：AAV衣壳滴度定量、空壳率检测及病毒颗粒稳定性评估，优化生产工艺‌。

• ‌抗体-抗原互作分析‌：快速筛选单克隆抗体与AAV衣壳蛋白的结合特异性，辅助抗体工程改造‌。

• ‌生物类似药一致性评价‌：通过亲和力差异分析验证候选药与原研药的衣壳结合特性‌。

2. ‌数据交付标准‌

• ‌核心参数报告‌：包含滴度值（vg/mL）、空壳率（%）、动力学参数（kon/koff/KD）及统计学误差分析‌。

• ‌原始数据与可视化输出‌：提供BLI传感器原始信号轨迹（*.csv格式）、结合热图及批次间滴度对比柱状图，满足监管申报或论文发表需求‌。

• ‌质控记录‌：实验条件日志（如温度、探针类型）、样本处理流程及仪器校准记录，确保数据可追溯性‌。

通过Gator Bio分子互作仪的高精度BLI技术，可高效支持从基础研究到工业级生产的全流程需求，为生物制药与基因治疗领域提供可靠的定量分析解决方案‌。

注：请按附件要求填写样本信息表，由小鳄生物进行技术评估。

Gator Bio依托自主研发的Gator®系列生物分子相互作用分析系统‌，提供基于生物膜层干涉技术（BLI）的高精度非标记亲和力检测服务。该服务采用无需生物素标记的实时动态检测方案，可精准解析蛋白等生物分子间的结合/解离动力学参数（包括Ka、Kd、KD值）‌，具备以下核心优势：

Gator生物分子相互作用仪 (BLI)

实验步骤和传感曲线图

• ‌超高灵敏度‌：专利V-Groove光学探针技术‌结合自动调平系统，检测限低至0.025 µg/mL‌，可捕捉弱结合相互作用；

• ‌复杂样本兼容性‌：通过自适应温控模块（4℃-40℃）‌3和可调震荡参数设计，支持血清、细胞裂解液等复杂基质样本的直接分析；

• ‌高通量自动化‌：采用384孔板同步检测系统‌，配合智能分析软件，单日可完成超过200组样本的标准化检测；

• ‌数据可靠性‌：通过ISO认证的质量控制体系，提供原始结合曲线、拟合分析图谱及完整实验报告。

该服务已广泛应用于抗体药物表征、靶点筛选及生物标志物验证领域，为生物制药企业及科研机构提供符合GLP标准的全流程解决方案‌。

一、技术平台与原理‌

‌生物膜干涉（Biolayer lnterferometry，BLI）技术是一种非标记检测方法，通过测量光纤生物传感器表面反射光的干涉图谱来实时检测生物分子间相互作用。Gator Bio光纤生物传感器是先将直径1mm的玻璃光纤的末端镀上专利光学层，再继续镀上特定的化学层，比较光纤生物传感器表面化学层结合生物分子后反射光的干涉图，实时监测由于生物分子积累引起的干涉变化，即可高灵敏地分析和计算目标蛋白质之间的结合和解离速率。结合信号与结合分子的大小和浓度成正相关。

BLI技术优势

Gator Bio创始人2001年正式提出BLI技术。

BLI技术于2021年，作为非标记检测方法被列入《美国药典》，用于检测分子相互作用的方法之一，同时

也被收入了药典有关抗体Fc介导的效应功能活性评价方法的章节。

BLI技术在2024年2月，被国家药吊监督管理局药品审评中心（CDE）列入《抗体偶联药物药学研究与评价技术指导原则》中，作为规范和指导抗体偶联药物（ADC）产品研发与上市申报中检测结合活性的方法之一。

Gator基于BLI技术用于检测生物分子互作优势：

• 样品及缓冲液无需脱气处理，可直接检测粗样

• 检测过程样品消耗很少，可以回收利用

• 多样的探针选择，可根据实验需求定制

• 无流路系统，无堵塞风险，仪器免维护

• 检测和分析一体化软件，操作简单

• 全面的互作信息：定量、动力学、亲和力、表位分组......

Gator检测系统

Gator系统由分析仪器、光学探针、数据采集和分析一体化软件组成。基于新一代生物膜干涉技术（BLI），通过采集、分析光纤生物传感器表面反射干涉光谱的信号变化来实时检测生物分子间的相互作用。从而得到名种生物反应参数，例如亲和力常数、蛋白浓度、表位分组等。具有使用简便、多功能、应用广泛和高通量等特点，可应用于生物药研发、生产以及生命科学研究等种领域。

Gator系统应用范围

Gator系统基于新一代生物膜干涉技术（BLI），较传统BLI产品具有更高的灵敏度和更强大的性能，可检测小到150 Da的小分子、核酸、多肽、蛋白，大到脂质体、病毒等生物分子。可被广泛应用于药物靶点筛选、抗体研发各阶段、分子递送系统、基因治疗AAV衣壳病毒载体表征等领域；可进行抗体滴度测定、解离常数排序、亲和力常数测定、表位分组、AAV衣壳滴度和空壳率检测等应用，满足多种生物分子的检测需求。

‌设备配置‌：

‌Gator® Pro‌：32通道并行检测，单次运行可分析1,152个样本，支持高通量AAV病毒载体分析；

‌Gator® Pivot‌：16通道并行检测，配备温度控制（15℃-40℃）和防蒸发模块，适用于热不稳定蛋白分析；

‌Gator® Plus‌：优化基线稳定性，可检测pM级亲和力参数，兼容96/384孔板。