Gator Bio新一代BLI表位分组检测

Gator Bio新一代BLI表位分组检测技术服务

表位分组：针对同一个抗原的一组特性mAb进行两两配对实验，评估它们是否存在克争关系。存在竞争关系的抗体被分成一组，代表结合抗原同一表位。

阻断实验：常用于检测配体、受体和抗体之间的关系，评估抗体是否能阻断受体与配体的结台。

使用Gator BLI方法进行“表位分组"和“阻断实验"常用检测方法有：串联法、预混法、夹心法。

案例分享

技术优势与核心创新

1. ‌高分辨率表位图谱解析‌

• 基于生物膜干涉（BLI）技术，实时监测抗体与抗原的结合竞争关系，通过动态解离速率（‌koff‌）差异区分表位重叠或独立区域，分辨率达单表位级别‌。

• 支持单次实验同时分析10-20种抗体对的竞争结合模式，显著提升多克隆抗体表位分组的效率‌。

2. ‌高通量与自动化兼容性‌

• 配备16通道并行检测系统，单次实验可完成384孔板中上千组抗体-抗原互作分析，适配大规模抗体药物筛选需求‌。

• 集成探针再生功能（可重复使用≥10次），结合自动化样本加载，实现连续24小时无人值守运行‌。

3. ‌复杂样本兼容性‌

• 可直接检测粗提液、血清或细胞上清中的抗体/抗原，无需纯化步骤，保留天然构象并减少实验偏差‌。

• 支持膜蛋白（如GPCR）表位分析，通过脂质包膜或VLP技术维持膜蛋白活性，解决低丰度样本检测难题‌。

样本要求与处理规范

1. ‌1. 样本类型与处理

2. 适用样本：‌

• ‌抗体样本‌：单克隆/多克隆抗体（浓度≥0.1 mg/ml）、血清多抗（需去除脂蛋白干扰）‌。

• ‌抗原样本‌：重组蛋白（纯度≥80%）、膜蛋白包膜颗粒（如VLP）、细胞表面抗原粗提液‌。

‌禁忌样本‌：含高浓度去污剂（如Triton X-100＞0.1%）、强酸/强碱溶液（pH<5.5或>8.5）或浑浊悬液‌。

3. ‌2. 实验设计建议‌

• ‌抗体对要求‌：每组表位分析需包含至少3个已知表位的参照抗体，用于校准竞争结合阈值‌。

• ‌对照设置‌：需包含阳性对照（同表位抗体）和阴性对照（无关抗体），确保数据可靠性‌。

4. ‌保存与运输‌

• 抗体样本可短期（<1周）4℃保存，长期需分装后-80℃冻存，避免反复冻融（≤3次）‌。

• 抗原样本若含脂质包膜结构，需在运输中使用干冰或液氮维持低温稳定性‌。

典型应用场景与数据交付

     1‌.核心应用场景‌

‌抗体药物开发‌：筛选非竞争性抗体对，指导双特异性抗体或抗体鸡尾酒疗法的组合设计‌。

‌生物类似药一致性验证‌：通过表位重叠分析，证明候选药与原研药的作用机制一致性‌。

‌疫苗研发‌：评估多价疫苗中不同抗原表位的免疫应答覆盖范围，优化抗原组合‌。

2. 数据交付标准

1. 核心报告‌：

2. 表位竞争结合热图（显示抗体对竞争强度分级）‌。

3. 表位聚类分析结果（基于koff值差异的分组树状图）‌。

原始数据包‌：


4. 实时结合/解离曲线（*.csv格式）及实验条件日志‌。

5. 传感器原始信号轨迹与质控记录（含探针再生次数）‌。‌‌

6. ‌可视化输出‌：

7. 支持定制化图表（如三维表位空间分布模型），满足专利申请或监管申报需求‌。
   

通过Gator Bio分子互作仪的BLI技术，可高效实现抗体表位的高通量、高分辨率分组分析，为药物研发与生物类似药评价提供关键决策依据‌。

注：请按附件要求填写样本信息表，由小鳄生物进行技术评估。

Gator Bio依托自主研发的Gator®系列生物分子相互作用分析系统‌，提供基于生物膜层干涉技术（BLI）的高精度非标记亲和力检测服务。该服务采用无需生物素标记的实时动态检测方案，可精准解析蛋白等生物分子间的结合/解离动力学参数（包括Ka、Kd、KD值）‌，具备以下核心优势：

Gator生物分子相互作用仪 (BLI)

实验步骤和传感曲线图

• ‌超高灵敏度‌：专利V-Groove光学探针技术‌结合自动调平系统，检测限低至0.025 µg/mL‌，可捕捉弱结合相互作用；

• ‌复杂样本兼容性‌：通过自适应温控模块（4℃-40℃）‌3和可调震荡参数设计，支持血清、细胞裂解液等复杂基质样本的直接分析；

• ‌高通量自动化‌：采用384孔板同步检测系统‌，配合智能分析软件，单日可完成超过200组样本的标准化检测；

• ‌数据可靠性‌：通过ISO认证的质量控制体系，提供原始结合曲线、拟合分析图谱及完整实验报告。

该服务已广泛应用于抗体药物表征、靶点筛选及生物标志物验证领域，为生物制药企业及科研机构提供符合GLP标准的全流程解决方案‌。

一、技术平台与原理‌

‌生物膜干涉（Biolayer lnterferometry，BLI）技术是一种非标记检测方法，通过测量光纤生物传感器表面反射光的干涉图谱来实时检测生物分子间相互作用。Gator Bio光纤生物传感器是先将直径1mm的玻璃光纤的末端镀上专利光学层，再继续镀上特定的化学层，比较光纤生物传感器表面化学层结合生物分子后反射光的干涉图，实时监测由于生物分子积累引起的干涉变化，即可高灵敏地分析和计算目标蛋白质之间的结合和解离速率。结合信号与结合分子的大小和浓度成正相关。

BLI技术优势

Gator Bio创始人2001年正式提出BLI技术。

BLI技术于2021年，作为非标记检测方法被列入《美国药典》，用于检测分子相互作用的方法之一，同时

也被收入了药典有关抗体Fc介导的效应功能活性评价方法的章节。

BLI技术在2024年2月，被国家药吊监督管理局药品审评中心（CDE）列入《抗体偶联药物药学研究与评价技术指导原则》中，作为规范和指导抗体偶联药物（ADC）产品研发与上市申报中检测结合活性的方法之一。

Gator基于BLI技术用于检测生物分子互作优势：

• 样品及缓冲液无需脱气处理，可直接检测粗样

• 检测过程样品消耗很少，可以回收利用

• 多样的探针选择，可根据实验需求定制

• 无流路系统，无堵塞风险，仪器免维护

• 检测和分析一体化软件，操作简单

• 全面的互作信息：定量、动力学、亲和力、表位分组......

Gator检测系统

Gator系统由分析仪器、光学探针、数据采集和分析一体化软件组成。基于新一代生物膜干涉技术（BLI），通过采集、分析光纤生物传感器表面反射干涉光谱的信号变化来实时检测生物分子间的相互作用。从而得到名种生物反应参数，例如亲和力常数、蛋白浓度、表位分组等。具有使用简便、多功能、应用广泛和高通量等特点，可应用于生物药研发、生产以及生命科学研究等种领域。

Gator系统应用范围

Gator系统基于新一代生物膜干涉技术（BLI），较传统BLI产品具有更高的灵敏度和更强大的性能，可检测小到150 Da的小分子、核酸、多肽、蛋白，大到脂质体、病毒等生物分子。可被广泛应用于药物靶点筛选、抗体研发各阶段、分子递送系统、基因治疗AAV衣壳病毒载体表征等领域；可进行抗体滴度测定、解离常数排序、亲和力常数测定、表位分组、AAV衣壳滴度和空壳率检测等应用，满足多种生物分子的检测需求。

‌设备配置‌：

‌Gator® Pro‌：32通道并行检测，单次运行可分析1,152个样本，支持高通量AAV病毒载体分析；

‌Gator® Pivot‌：16通道并行检测，配备温度控制（15℃-40℃）和防蒸发模块，适用于热不稳定蛋白分析；

‌Gator® Plus‌：优化基线稳定性，可检测pM级亲和力参数，兼容96/384孔板。