产品名称：RTL 逆转录酶（无甘油）

规格或纯度：BioReagent, 用于DNA合成, 适用于分子生物学, EnzymoPure™, 无RNA酶, PCR试剂, 用于体外转录, for DNA and RNA applications, 15 U/μL

产品介绍：

RTL 逆转录酶 2.0 是一种依赖 RNA 模板的DNA 聚合酶，缺少 3' → 5' 的核酸外切酶活性， 具有 RNase H 活性。该酶可利用 RNA作为模板 ，合成一条互补的 DNA 链，可应用于第一链cDNA合成 ，特别适用于RT-LAMP（环介导等温扩增）。相较于 RTL逆转录酶 1.0，灵敏度显著提升，热稳定性更强，65℃高温反应更稳定。RTL 逆转录酶 2.0（无甘油）可用于制备冻干制剂、可冻干RT-LAMP 试剂等。 

产品组分

产品应用
1） cDNA 合成；
2） 与阿拉丁Bst DNA 聚合酶 V2 系列产品联合使用，进行 RT-LAMP 等温扩增检测靶标 RNA。
单位定义
以Poly (rA)·Oligo (dT) 为模板/引 物， 在50℃，20min 条件下，掺入1 nmol的dTTP为酸不溶性物质所需要酶量定义为 1 个活性单位 (U)。 

质量控制
1、核酸内切酶残留检测：15U本酶和1μgλ-DNA，在 37℃下孵育 16h，琼脂糖凝胶电泳 DNA 谱带不发生明显变化。
2、核酸外切酶检测：15U 本酶和 1μg λ-HindIIIDNA，在 37℃下孵育 4h，琼脂糖凝胶电泳DNA 谱带不发生明显变化。
3、核酸切口酶检测：15U 本酶和 1μg pBR322DNA，在 37℃下反应 4h，琼脂糖凝胶电泳DNA 谱带缺刻<10%。
4、RNase 残留检测：15U 本酶和 0.48μg MS2 RNA 在 37℃下孵育 4h，RNA 电泳谱带完整度>90%。
5、大肠杆菌 DNA 残留检测：15U 本酶中残留的核算经 E.coli gDNA 特异性 TaqMan qPCR检测，E.coli 基因组残留<1copy。

实验流程

逆转录反应体系：

注：TotalRNA推荐使用量1ng~1μg

       mRNA推荐使用量50ng~100ng

反应程序

ⓐ如使用RandomPrimerMix增加该孵育步骤；

ⓑ可在10-30min间调整。延长逆转录时间有助于获得更长的cDNA(>5kb)

RT-LAMP反应体系

体系配制完成，涡旋混合均匀，65°C反应1h。

*注：此二者buffer互通，组分完全相同

注意事项

 1）本产品在-20℃保存会形成白色固体，从 -20℃取出后放冰上 10 分钟左右，融化后震 荡混匀即可使用；

 2）cDNA 产物可在-20℃或者-80℃保存或立 即用于 PCR 反应； 

3）防止 RNase 污染，请保持实验区域洁净， 操作时需穿戴干净的手套、口罩。实验所用的 离心管、吸头等耗材均需保证 RNase-free。

级别：BioReagent, PCR试剂, 用于DNA合成, 适用于分子生物学, EnzymoPure™, 无RNA酶, 用于体外转录, for DNA and RNA applications

浓度：15 U/μL

储存温度：-20°C储存,避免反复冻融

运输条件：超低温冰袋运输

稳定性与储存：Store at -20℃ long term (18 months). Upon receipt, it is recommended to aliquot. Avoid freeze/thaw cycle.

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