中文名:考马斯亮蓝染色试剂盒 (常规法)
英文名:Coomassie Blue Staining Kit
纯度:BioReagent, for western blot, 用于聚丙烯酰胺凝胶电泳
货号:C777646
存储温度:避光,室温
产品介绍:
考马斯亮蓝染色试剂盒采用了最经典的考马斯亮蓝染色和脱色方法,以考马斯亮蓝R250为染料,可用于SDS-PAGE或非变性PAGE等蛋白电泳凝胶的常规染色和脱色,或Western转膜后PAGE胶上残余蛋白的检测。
C777646
| Component
| 1Kit | Storage |
C777646A
| 考马斯亮蓝染色液
| 100 mL
| RT. Store in the dark.
|
C777646B
| 考马斯亮蓝染色脱色液
| 500 mL
| RT. |
使用说明:
1、常规染色脱色方法
1.1 电泳结束后,取凝胶放入适量考马斯亮蓝染色液中,确保染色液可以充分覆盖凝胶。
1.2 置于水平摇床或侧摆摇床上缓慢摇动,室温染色1h或更长时间。
注:具体的染色时间取决于凝胶的厚度和染色时的温度。凝胶较厚,温度较低,则染色时间宜适当延长。凝胶较薄,温度较高,则染色时间可以适当缩短。通常染色至凝胶的颜色和染色液的颜色非常接近,在染色液中几乎看不清凝胶时,可以认为已染色充分。
1.3 倒出染色液。染色液可以回收重复使用至少2-3次。
1.4 加入适量考马斯亮蓝染色脱色液,确保脱色液可以充分覆盖凝胶。
1.5 置于水平摇床或侧摆摇床上缓慢摇动,室温脱色4-24h。期间更换脱色液2-4次,直至蓝色背景基本上全部被脱去,并且蛋白条带染色效果达到预期。通常蛋白条带在脱色1-2h后即可出现。注:脱色时间过长也会导致蛋白条带的颜色变浅。
1.6 完成脱色后,可把凝胶保存在水中,用于后续的拍照等。保存在水中的凝胶会发生溶涨。如需避免溶涨,可以把胶保存在含20%甘油的水中。长期保存可以制备干胶。
2、快速染色脱色方法
2.1 电泳结束后,取胶放入适量考马斯亮蓝染色液中,微波炉加热至接近沸腾或刚刚沸腾,立即停止加热。通常大于10%的胶比较坚韧,在煮沸时不易破损;对于小于10%的胶,宜尽量避免煮沸,以免出现胶碎裂的情况。
2.2 随后在染色液温度较高的情况下,在室温摇床上摇动5-10min。
2.3 倒出染色液。染色液可以回收重复使用至少2-3次。
2.4 加入适量考马斯亮蓝染色脱色液,确保染色液可以充分覆盖凝胶。
2.5 微波炉加热至接近沸腾或刚刚沸腾,立即停止加热。
2.6 随后在脱色液温度较高的情况下,在摇床上摇动5-10min。此时通常可以观察到比较清楚的蛋白条带。
2.7 更换新鲜的脱色液,重复步骤5和步骤6,直至蓝色背景基本上全部被脱去,蛋白条带染色效果达到预期。
2.8 完成脱色后,可以把凝胶保存在水中,用于后续的拍照等。保存在水中的凝胶会发生溶涨。如需避免溶涨,可以把胶保存在含20%甘油的水中。长期保存可以制备干胶。
注意事项:
为了您的自身安全,使用试剂前,请做好防护,如穿实验服,带手套等。
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