1. 产品介绍
本制品和传统的 T4 连接酶原理不同,它利用了 Topoisomerase 可以在瞬间、高效连接 DNA 片段的原理及工艺制成,可以在瞬间完成任意 PCR 产物(兼容 A 末端/平末端)连接。特制的新型载体质粒大小仅仅不到 2kb,充分发挥了 TOPO 载体越小,可容纳片段越大的优势,最大限度提高了大片段连接效率;连接后质粒大小比传统载体小 2 kb 以上,质粒越小,转化效率越高,极大的提高了各种片段连接后的转化子数量。采用氨苄抗性载体只需 10 分钟复苏时间,比卡那抗性载体 1 小时复苏时间缩短 6 倍,从连接到涂板最快只需 15-20 分钟。转化过程中可以不用冰浴和热休克,最快室温 5 分钟内完成转化;自杀基因零背景原理,无自连假阳性。连接长片段能力远超传统 TA 克隆载体,可连接长达10kb 片段,是新一代的简单、 快速、零背景免筛选的 TOPO 克隆载体。
2. 产品特点
1).兼容性强、瞬间连接:几秒钟-几分钟完成任意 PCR 产物(兼容 A 末端/平末端)连接。
2).质粒载体小、容载片段大、转化效率高:新型载体质粒大小仅仅不到 2kb,连接后质粒大小比传统载体小 2kb 以上,质粒越小,转化效率越高。
3).转化快速、方便:只需 10 分钟复苏时间,最快可以不用冰浴和热休克,室温 5 分钟内完成转化,从连接到涂板最快只需 15-20 分钟。
4).阳性率高:采用自杀基因零背景原理,无自连假阳性。
3. 试剂盒组份
| 试剂盒组成 | 储存条件 | 20 次(CE1111-01) | 50 次(CE1111-02) |
| pTOPO-TA/Blunt Vector(30 ng/mL) | -20 ℃ | 40 μL | 160 μL |
| 1000 bp Control(30 ng/mL) | -20 ℃ | 5 μL | 5 μL |
| 10×Enhancer | -20 ℃ | 20 μL | 80 μL |
4. 储存事项
1). 冰袋运输,室外常温放置 1-2 天不影响质量。
2). 避免试剂长时间置于室温,避免反复冻融。
5. 稳定性
本试剂盒在-20 ℃储存,12 个月不影响使用效果。