在抗体偶联药物(ADC)和GPCR靶点药物研发中,内吞效率往往决定药物的最终疗效,但传统检测方法存在背景干扰强、操作复杂、通量低等问题。瑞孚迪(Revvity)推出的pHSense™ Eu探针,创新性地将pH敏感型Eu探针与时间分辨荧光(TRF)检测相结合,为ADC及GPCR研究带来颠覆性解决方案!
检测方法 | 核心缺陷 | pHSense™ Eu优势 |
ADC 内吞 | 基于流式+pH探针的检测 | 实验操作长,不适配高通量检测; 重复性差;灵敏度不高;窗口不大; 无法单孔多时间点读数;需避光 | 极低背景、更高信号比; 兼容悬浮细胞及贴壁细胞; 支持高通量多时间点检测; 操作简便,无需避光; 基于酶标仪,数据更客观 |
基于活细胞成像+pH探针的检测 | 仪器成本高;染料价格较贵; 悬浮细胞成像难;信噪比低;通量一般 |
基于毒素偶联的杀伤检测 | 终点法,不能多时间点检测; 间接法,可能会有假阳性的情况出现; 某些细胞系无法被毒素杀伤 |
基于温度转变的荧光二抗检测 | 不能实现定量标准化;重复性差 |
GPCR 内吞 | 基于互补片段设计的报告基因法 | 基因改造细胞系,成本高;半衰期短 | 兼容商品化细胞系、未经修饰及原代细胞; 支持动力学检测 |
酶片段互补技术 | 基因改造细胞系,成本高; 不支持实时动力学检测 |
pHSense Eu探针用于基于时间分辨荧光的抗体与抗体偶联药物(ADC)内化实时监测

细胞内抗体转运及pHSense Eu探针的pH响应信号激活示意图
