单抗从头测序检测方案
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基于质谱的单抗从头测序
单克隆抗体是生物医药领域的重要工具，广泛应用于疾病预防、诊断和治疗，特别是在癌症和自身免疫病的治疗中发挥着关键作用。抗体分子的一级结构，尤其是CDR的氨基酸序列，对于抗体的疗效和安全性至关重要。我们基于质谱的从头测序技术（De Novo）不依赖于传统的蛋白质数据库搜索或核酸编码序列，利用高精度质谱设备直接对单克隆抗体蛋白进行氨基酸序列解析。
技术优势
全面解析单克隆抗体序列，获取CDR区核心信息
多酶酶切全序列覆盖
采用至少 5 种不同的蛋白酶进行多重酶切，确保单抗分子轻重链的 100% 全序列覆盖。通过多种酶切肽段的互补性，实现完整序列的精确拼接。
CDR区域高准确性标识
抗体核心区域CDR序列至少鉴定到10种不同肽段，保障CDR序列识别准确性。
高精度与高分辨质谱
最新型三合一全能质谱Eclipse，准确识别抗体中的微小变异和复杂的翻译后修饰，支持HCD、ETD、UVPD等多种碎裂方式，增强序列覆盖和准确性。
高可信度图谱支撑
每个氨基酸在肽段二级质谱图中展示出强离子片段峰，结合碎片信息和分子量差异可精确区分每一个氨基酸。
实验流程
标准化的样品处理与严谨的序列解析
样品预处理
5种不同蛋白酶酶切处理(Trypsin、LysC、Pepsin等)
质谱分析
Orbitrap Eclipse采集数据，HCD/CID/EThcD多种碎裂模式
肽段测序
De Novo算法自动化测序和序列组装
完整性验证
完整分子量精确验证+质谱图谱人工核对
服务流程
从样本接收到成果交付全周期服务：测序周期短、成本低、成功率高
样本寄送
客户提供单克隆抗体样本
样本质检
实验室评估样本质量进行
质谱数据采集
蛋白酶解和质谱测序
时间：1周完成
从头测序分析
De Novo测序及序列组装
时间：2周完成
出具报告
提供全面准确的序列信息
总周期：全流程2-3周
抗体验证
客户进行抗体验证
注：特殊复杂样品处理时间可能适当延长，我们会提前与客户沟通时间安排。
送样建议
确保提供符合要求的样品以获得最佳结果
| 相关事项 | 具体要求 |
|---|---|
| 样本量 | ＞200μg单克隆抗体蛋白 |
| 纯度 | ＞80%（目标蛋白占总蛋白量的80%以上） |
| 浓度 | ＞0.5 μg/μL |
| 其他 | 无相同抗原的抗体蛋白 |
交付结果
详细的分析报告与可追溯原始数据
标准交付成果
抗体轻链和重链的完整氨基酸序列
CDR区域精准注释与定位图
轻重链CDR1/2/3质谱谱图
全序列覆盖度/位点测序深度可视化图谱
分子量检测结果及偏差分析
完整实验流程与测序报告
技术资料
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