基本描述
产品名称:重组λ蛋白磷酸酶
规格或纯度:无动物源, 生物活性, ActiBioPure™, EnzymoPure™, ≥95%, 70 U/μL
产品介绍:
本公司生产的 Lambda Protein Phosphatase (重组λ蛋白磷酸酶),即λ Protein Phosphatase,是一种锰离子(Mn²⁺)依赖的重组表达纯化的磷酸蛋白酶,可以对磷酸化的丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸和组氨酸残基进行脱磷酸反应。本产品是大肠杆菌重组表达的带 6×His 标签的重组λ磷酸酶。该磷酸酶由λ噬菌体开放阅读框 ORF221 所编码,编码产物共包含 221 个氨基酸残基。Lambda Protein Phosphatase 可以用于蛋白的去磷酸化,从而可以用于研究蛋白磷酸化与其活性和结构的关系,以及验证蛋白磷酸化位点抗体的特异性等。
| 来源(Source) | 大肠杆菌重组表达 | | 分子量(Molecular Weight) | 26kDa | | 外观(Appearance) | 无菌液体 | | 保存液(Storage Buffer) | 50mM This-HCl , 100mM NaCl, 0.1mM MnCl₂, 0.1mM EGTA, 2mM dithiothreitol (DTT), 0.01%Brij35, 50%(v/v) glycerol, pH7.5 | | 酶浓度(Enzyme Concentration) | 70U/μL | | 纯度(Purity) | ≥95% | | 活性定义(Activity Definition) | 在30℃ pH7.5 条件下反应 1 分钟,能够水解 1nmol p-nitrophenyl phosphate 所需的酶量定义为一个活性单位 |
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组分和说明
| L747583-CG20KU | Component | 20KU | 5*20KU | Storage | | L747583A | Lambda Protein Phosphatase (70U/µl) | 300μl | 5*300μl | -20℃. Avoid freeze/thaw cycle. | | L747583B | 10× Lambda Protein Phosphatase Buffer | 1ml | 5*1ml | -20℃. Avoid freeze/thaw cycle. | | L747583C | 10× MnCl₂ (10mM MnCl₂) | 1ml | 5*1ml | -20℃. Avoid freeze/thaw cycle. |
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产品应用
对磷酸化的丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸和组氨酸残基进行脱磷酸反应
产品优势
Lambda Protein Phosphatase 可以用于蛋白的去磷酸化,从而可以用于研究蛋白磷酸化与其活性和结构的关系,以及验证蛋白磷酸化位点抗体的特异性等。
使用说明
1. Lambda Protein Phosphatase 对不同蛋白的脱磷酸化反应有不同活性,所以在实际应用中,我们建议对酶浓度和反应时间进行优化。反应体系中,反应缓冲液为 1× Lambda Protein Phosphatase Buffer 并且同时加入 1× MnCl₂ (最终浓度为 1mM)。
2. 以一般的去磷酸化反应为例:在 50μl 反应体系中,100U 的 Lambda Protein Phosphatase 在 30 分钟内可以除去相当于 5μM 的磷酸化的蛋白(单磷酸化)中约 100%的磷酸。
保存条件:
-20ºC 保存,1 年有效,≤0℃运输。
注意事项:
(1)反复冻融会导致 Lambda Protein Phosphatase 酶活性降低。如果希望在-80℃冻存,建议适当分装后保存,以方便后续使用。在-20℃存放时不会结冻,但在-80℃冻存时会结冻。
(2)10mM 钒离子(vanadate ions)能抑制 Lambda Protein Phosphatase 活性约 90%,50mM EDTA 可以抑制 Lambda Protein Phosphatase 活性约 95%,1% Triton X-100、0.4% Nonidet P-40、0.025% Tween 20、0.5M NaCl、0.1mM ATP、10μg/ml pepstatin A、10μg/ml leupeptin, 10μ
g/ml aprotinin, 0.5mM PMSF、1mM benzamidine 不影响 Lambda Protein Phosphatase 的酶活性。
(3)需要注意的是不同蛋白脱磷酸化反应的速率是不同的,该酶的最佳反应温度是 30℃。某些样品的粗提液用该酶进行去磷酸化处理时,请注意用尽可能短的时间进行处理,同时添加适量蛋白酶抑制剂以减少目的蛋白的降解。
(4)本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
(5)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
无载体:Yes
无动物源:Yes
预测分子量:26kDa
SDS-PAGE:26kDa
级别:无动物源, 生物活性, ActiBioPure™, EnzymoPure™
产品规格参数
储存缓冲液:50mM This-HCl , 100mM NaCl, 0.1mM MnCl₂, 0.1mM EGTA, 2mM dithiothreitol (DTT), 0.01%Brij35, 50%(v/v) glycerol, pH7.5
浓度:70 U/μL
储存条件:-20°C储存,避免反复冻融
运输条件:超低温运输
稳定性与储存:长期储存 -20℃(24个月), 避免反复冻融
CAS编号和信息:401941-75-1
单位定义:在30℃ pH7.5条件下反应1分钟,能够水解1nmol p-nitrophenyl phosphate所需的酶量定义为一个活性单位。
功能和特点
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