基本描述
产品名称:辣根过氧化物酶(HRP)
规格或纯度:生物活性,ActiBioPure™,天然,高性能,EnzymoPure™,≥300U/mg enzyme powder, Rz≥3; from Horseradish
应用:WB, Antibody labelling, ELISA, EMSA, IHC, 酶活性检测, Southern blotting, Northern blotting
产品介绍:
辣根过氧化物酶是一种具有氧化还原酶属性的血红蛋白,是临床化学试剂中的常用酶,可与抗体、抗原或链霉亲和素等进行偶联,广泛应用于临床诊断、免疫检测、化学发光、ELISA、免疫组化及生化研究等。
一、产品基本信息
1. 名称:辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase,HRP)
2. 来源:植物辣根(Armoracia rusticana)根部提取
3. 分子量:约 40 kDa(单链多肽,含 4 个二硫键)
4. 活性单位:≥300 单位 / 毫克
5. 纯度指标:RZ 值(Reinheit Zahl)≥3.0(反映血红蛋白与酶蛋白的纯度比)
6. 储存条件:-20℃干燥避光保存,复溶后 4℃稳定 6 周,长期需分装 -70℃冻存。
二、理化性质
1. 外观:棕褐色结晶物质或冻干粉
2. 溶解性:易溶于水,在 58% 硫酸铵饱和度以下可溶
3. 稳定性:
• pH 范围:3.0-9.0(等电点)
• 耐温性:63℃加热 15 分钟仍保持活性
4. 抑制剂:叠氮化钠、氰化物、重金属离子(Cd²+、Cu²+ 等)
三、功能与应用
1. 催化机制HRP 催化过氧化氢(H₂O₂)参与的氧化反应,将底物(如 DAB、TMB 等)转化为显色产物。
2. 主要应用领域
| 应用类型 | 具体用途 | 示例方法 |
|---|
| 检测免疫 | ELISA、Western Blot、免疫组化(IHC)的抗体标记 | HRP 标记二抗 + 链亲和素 |
| 分子生物学 | 核酸杂交(Southern/Northern Blot)、EMSA 的探针标记 | 生物素 - 链霉亲和素系统 |
| 生化分析 | 葡萄糖过氧化物定量检测 | 比色法 / 化学发光法 |
| 病理研究 | 神经元追踪(轴浆运输示踪) | HRP 逆行标记法 |
四、使用指南
1. 标记操作(以抗体标记为例)
• 标记方法:戊二醛交联法、过碘酸氧化法
• 推荐比例:HRP: 抗体 = 1:1-1:3(摩尔比)
• 纯化步骤:凝胶过滤层析去除游离酶
2. 显色体系
| 底物 | 显色产物 | 检测方式 | 适用场景 |
|---|
| DAB | 棕色沉淀 | 光学显微镜 / 化学成像 | 免疫组化、Western Blot |
| TMB | 蓝色可溶物(酸化后变黄) | 酶标仪(450 nm) | ELISA |
| ECL 化学发光剂 | 发光信号 | X 光片 / 化学发光成像仪 | 高灵敏度 Western Blot |
五、注意事项
1. 避免反复冻融:分装后 - 70℃保存,活性避免损失;
2. 抑制剂干扰:避免使用含叠氮钠(NaN₃)的缓冲液;
3. 安全防护:接触 DAB 时需佩戴手套,废液按有害化学物质处理;
4. 优化建议:不同应用需调整 HRP 浓度(如 Western 推荐 1:2000-1:10000 稀释)。
生物活性:≥300U/mg enzyme powder
Accession #:P00433,P80679,P15233,Q42517,P59121,P15232,P17180,P17179
预测分子量:40 kDa
级别:生物活性, ActiBioPure™, 天然, 高性能, EnzymoPure™
产品规格参数
浓度:≥300U/mg enzyme powder, Rz≥3; from Horseradish
储存条件:避光,-20°C储存,干燥,避免反复冻融
运输条件:超低温运输
稳定性与储存:长期储存-20℃(24个月);复溶后建议分装,避免反复冻融;避光;密封。
CAS编号和信息:9003-99-0
酶学委员会编号:EC 1.11.1.7
单位定义:One unit will form 1.0 milligram of purpurogallin from pyrogallol in 20 second at pH 6.0 at 20℃.
功能和特点
Accession #:P00433,P80679,P15233,Q42517,P59121,P15232,P17180,P17179
生物活性:≥300U/mg enzyme powder
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