人微內皮細胞株，HMEC-1细胞说明书 CS-X0233

产品名称：人微內皮細胞株，HMEC-1细胞说明书
规格 ：1 x 10^6 cells/T25培养瓶
细胞特性
1）来源：

2）形态：内皮细胞，贴壁生长

3）含量：>1x106 个/mL

4）污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性

5）规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

人微內皮細胞株，HMEC-1细胞说明书细胞接受后的处理：
1）收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2）请先在显微镜下确认细胞生长状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。
3）弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的完全培养基。
4）如果细胞长满（90%以上）请及时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。
5）接到细胞次日，请检查细胞是否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：

1） 准备基础培养基( GIBCO，，添加NaHCO3 1.5g/L，丙酮酸钠 0.11g/L)；优质胎牛血清，10%。

2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。

3） 冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。

二． 细胞处理：

1） 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入250px皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。
1.一般客户拿到细胞后，应该注意什么？
客户收到细胞先不开盖，放在培养箱静置若干小时后（看细胞密度而定）在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议受收细胞时的培养基拍一张照片，观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞100X200X各一张），排除细胞本身污染的情况；收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。
收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过80%汇合度时，将培养瓶中培养液吸出，留下10ml培养液继续培养；超过80%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
MEF, 小鼠胚胎成纤维细胞

BABL/C2 BABL/C小鼠胚胎细胞

OMG Others Mouse 小鼠 OMG / OMGP (aa 1-245) 人细胞裂解液 (阳性对照)

CL-0174NRK-52E(大鼠肾小管导管上皮细胞)5×106cells/瓶×2

人羊膜上皮细胞裂解物HAmEpiCL

人胚肾细胞-F克隆;293F 人肾成纤维细胞完全培养基 100mL
CL-0127JEG-3(人细胞)5×106cells/瓶×2

IgG Others Rabbit 兔 IgG-Fc (185 Thr/Ala, Asn 284/Ser) 人细胞裂解液 (阳性对照)

小鼠小肠隐窝上皮细胞完全培养基 100mL

Hepa 1-6小鼠细胞 Hepa mouse hepatoma cell line 1-6 DMEM+10%FBS

IL6 Protein Mouse 重组小鼠 IL6 / Ierleukin-6 蛋白

Romas(人细胞) 5×106cells/瓶×2 WI-38(人二倍体胚肺细胞)
MEF, 小鼠胚胎成纤维细胞

BABL/C2 BABL/C小鼠胚胎细胞

OMG Others Mouse 小鼠 OMG / OMGP (aa 1-245) 人细胞裂解液 (阳性对照)

CL-0174NRK-52E(大鼠肾小管导管上皮细胞)5×106cells/瓶×2

人羊膜上皮细胞裂解物HAmEpiCL

人胚肾细胞-F克隆;293F 人肾成纤维细胞完全培养基 100mL
马铃薯-蔗糖培养基250g用于霉菌增菌培养

麦芽浸粉琼脂(MEA) 250(g) incubation media 麦芽浸粉琼脂(MEA) 250(g)

大肠杆菌显色培养基配套平皿 E.Coli Chromogenic Medium Dish 9㎝/块

乳酸菌、双歧杆菌检验incubationmedia乳酸菌、双歧杆菌检验

Voges-Proskauer(V-P)试剂盒 5ml*4 用于V-P试验
麦迪、麦白霉素检定培养基(普通轻质斜面培养基)250g麦迪(白)霉素效价测定

酪胨琼脂 250(g) incubation media 酪胨琼脂 250(g)

改良马丁培养基(真菌培养基) 250g 用于真菌培养及药品和生物制品无菌检查用。

肝浸粉养基原材料，为营养要求高的细菌提供生长营养成份incubationmedia肝浸粉养基原材料，为营养要求高的细菌提供生长营养成份

明胶磷酸盐缓冲液 250g 用于检测肉毒梭菌时样品稀释液
人微內皮細胞株，HMEC-1细胞说明书有机磷细菌培养基250g用于测定磷细菌肥料中磷细菌分解有机磷的的效能

EY Tellurite Enrichment incubation media EY Tellurite Enrichment

反曲毛壳 支/瓶

TCBS琼脂平板(9cm)用于致病性弧菌的选择性分离

高渗真菌学琼脂 250g 用于高渗食品中酵母菌和霉菌检测
人微內皮細胞株，HMEC-1细胞说明书细胞出现问题，不予以重发的情况有哪些？
（1）客户造成细胞污染，不重发；
（2）客户不正确操作致细胞状态不好，不重发；
（3）非推荐细胞培养体系致的细胞状态不好，不重发；
（4）细胞状态不好，未提供细胞培养前3天照片的，不重发；
（5）细胞培养时经其它处理的，不重发；
（6）细胞收到2天内，未告知，不重发；
（7）视具体情况而定。