人细胞，HT-1376细胞说明书 CS-X0057

产品名称：人细胞，HT-1376细胞说明书
规格 ：1 x 10^6 cells/T25培养瓶
细胞特性
1）来源：人

2）形态：上皮细胞样

3）含量：>1x106 个/mL

4）污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性

5）规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

人细胞，HT-1376细胞说明书细胞接受后的处理：
1）收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2）请先在显微镜下确认细胞生长状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。
3）弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的完全培养基。
4）如果细胞长满（90%以上）请及时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。
5）接到细胞次日，请检查细胞是否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：

1） 准备基础培养基( GIBCO，，添加NaHCO3 1.5g/L，丙酮酸钠 0.11g/L)；优质胎牛血清，10%。

2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。

3） 冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。

二． 细胞处理：

1） 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入250px皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。
1.一般客户拿到细胞后，应该注意什么？
客户收到细胞先不开盖，放在培养箱静置若干小时后（看细胞密度而定）在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议受收细胞时的培养基拍一张照片，观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞100X200X各一张），排除细胞本身污染的情况；收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。
收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过80%汇合度时，将培养瓶中培养液吸出，留下10ml培养液继续培养；超过80%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
BMP2 Protein Human 重组人 BMP-2 蛋白 (Fc 标签)

Calu-3 人(胸膜渗出液)

SLIK4 Others Human 人 SLIK4 / Slik4 人细胞裂解液 (阳性对照)

BGC-823-EGFP-puro人细胞 Human gasic cancer cells BGC-823-EGFP-puro 1640+10% Hyclone灭活血清+2ug/ml puromycin

小鼠;F9

人微内皮细胞 (HCMEC)( 5×105 ) SF9, 昆虫卵巢细胞 其它
CL-0467WPMY-1(人正常基质永生化细胞)5×106cells/瓶×2

CXCL16 Others Rat 大鼠 CXCL16 / SR-PSOX 人细胞裂解液 (阳性对照)

大鼠虹膜色素上皮细胞完全培养基 100mL

U-373MG人 U-373MG glioma cells DMEM+10% FBS

IL1B Protein Rabbit 重组兔 IL-1 beta / IL1B 蛋白

NCI-H358(人非小细胞细胞) 5×106cells/瓶×2 PC-12(肾上腺嗜铬细胞瘤细胞)
BMP2 Protein Human 重组人 BMP-2 蛋白 (Fc 标签)

Calu-3 人(胸膜渗出液)

SLIK4 Others Human 人 SLIK4 / Slik4 人细胞裂解液 (阳性对照)

BGC-823-EGFP-puro人细胞 Human gasic cancer cells BGC-823-EGFP-puro 1640+10% Hyclone灭活血清+2ug/ml puromycin

小鼠;F9

人微内皮细胞 (HCMEC)( 5×105 ) SF9, 昆虫卵巢细胞 其它
三糖铁琼脂培养基(TSI)药典2208g用于鉴别肠道菌发酵蔗糖、乳糖、葡萄糖及产生硫化氢的生化反应(《中华人民共和国药典》20..

7311-prf OEpiCM-prf 卵巢上皮细胞培养基 500 ml incubation media 7311-prf OEpiCM-prf 卵巢上皮细胞培养基 500 ml

乳糖胆盐发酵培养基 300ml/袋*10 用于大肠菌群，粪大肠菌群，大肠杆菌的测定(GB标准)

SodiumTelluriteBrothBase

STAAMedium
三糖铁琼脂培养基(TSI)2208g用于鉴别肠道菌发酵蔗糖、乳糖、葡萄糖及产生硫化氢的生化反应

12205 链球菌疫苗培养基 1 万 ml/袋 培养链球菌，用于猪及羊链球菌灭活菌苗 和检验 incubation media 12205 链球菌疫苗培养基 1 万 ml/袋 培养链球菌，用于猪及羊链球菌灭活菌苗 和检验

孟加拉红培养基 300ml/袋*10 用于食品中霉菌及酵母菌总数测定

甘露醇卵黄培养基基础250g用于金黄色葡萄球菌的分离培养，需加入50%卵黄乳液(Japan方法)

GramNegativeBacteriaSelectiveMedium
人细胞，HT-1376细胞说明书BufferedSodiumChloridePeptoneSolutionpH7.0

BPLS Agar Brilliant-green phenol-red-lactose sucrose agar 1.07232.0500 MERCK默克 incubation media BPLS Agar Brilliant-green phenol-red-lactose sucrose agar 1.07232.0500 MERCK默克

TyrosineAgarBase 500g 用于蜡样芽孢杆菌的L-酪氨酸分解试验。Tyrosine agar is used for tyrosine decompose test by B...

血液增菌培养基BloodEnrichmentMedium用于从血液中分离病原菌

乳杆菌选择性培养基(LBS琼脂) 250g 用于乳酸杆菌的分离培养
人细胞，HT-1376细胞说明书细胞出现问题，不予以重发的情况有哪些？
（1）客户造成细胞污染，不重发；
（2）客户不正确操作致细胞状态不好，不重发；
（3）非推荐细胞培养体系致的细胞状态不好，不重发；
（4）细胞状态不好，未提供细胞培养前3天照片的，不重发；
（5）细胞培养时经其它处理的，不重发；
（6）细胞收到2天内，未告知，不重发；
（7）视具体情况而定。