Proteomix AAV SAX色谱柱专门适用于腺相关病毒(AAVs)的空壳率快速定量分析及纯化。其色谱填料为高交联度的单分散非孔性聚苯乙烯/二乙烯基苯(PS/DVB)微球,无孔填料粒径为3μm。填料表面附有均一的纳米级厚度改性亲水的中性聚合物薄膜,减少非特异性吸附作用。亲水涂层顶端键合一层具有特殊化学性质的三甲基铵层作为强阴离子交换剂,具有高的离子交换容量和选择性,如图1所示。

产品特点
快速、简便且准确的定量分析
单分散型颗粒,保证高分辨率和批次间一致性
与MALS检测器兼容,具有低的脱落率和基线噪声
适用于多种AAV样本的分析方法开发
支持高达1 mL/min的高通量快速检测
应用案例
图2中,第一个峰代表空壳(empty capsids),第二个峰代表满载衣壳(full capsids),说明Proteomix AAV SAX色谱柱可以对AAV样品实现有效分离

图2. Proteomix AAV SAX分离AAV8混合物
色谱柱:Proteomix AAV SAX(3μm,4.6×50mm,PEEK)
流动相:A: 20 mM BTP, pH=9.0
B: 20 mM BTP + 500 mM TMAC, pH=9.0
梯度条件:0-100%B(10min)
流速:1.00 mL/min
样品:AAV8
进样量:10μL
柱温:25°C
检测波长:UV260nm、280nm
批次间一致性
图3显示了三种不同的批次的Proteomix AAV SAX色谱柱在MALS检测器上分离出AAV8混合物的Empty/Full衣壳情况。图中显示了包含两者比例为1:1的混合样本。相对分子量定量结果用++和xx线表示,对应于蛋白质和核酸的估计分子量;虚线代表总分子量。同时,还显示了混合样本在三个不同批次上UV 280 nm波长下的信号。图中展示了良好的批次间一致性。

图3. Proteomix AAV SAX色谱柱三个不同批次的一致性
Sample:2E+13 capsid/mL AAV8
(Full : Empty = 1:1);
Injection Volume:10 µl;
Injection Amount:2E+11 capsid
技术参数
| 产品名称 | Proteomix AAV SAX |
|---|
| 填料基质 | 高交联度单分散PS/DVB |
| 粒径 | 3 μm |
| 配基 | -N+(CH3)3 |
| 动态结合载量(DBC) | ~36 mg/mL |
| pH适用范围 | 2-9.5 |
| 操作温度 | 80 ℃ |
| 最大耐受压力 | 8000 psi |
| 操作压力 | ≤6000 psi(4.6×50mm PEEK) |
| 典型流速 | 0.1-1.0mL/min(对于4.6×50mm PEEK柱) |
| 流动相兼容性 | 与水溶液,水与乙腈、丙酮或甲醇混合物兼容。典型缓冲液:磷酸盐、Tris、醋酸盐等 |