中文名:Western快速转膜液(10X, 湿转&半干转)
英文名:Western Rapid Transfer Buffer (10X, Wet & Semi-dry)
纯度:BioReagent, for western blot, 无菌过滤, 10X
货号:W743360
存储温度:2-8°C储存
产品介绍:
阿拉丁的Western 快速转膜液(10×)是由阿拉丁生物自主研发的高效转膜液,可应用于湿转法转膜或者半干法转膜,能高效快速地将蛋白转移至 PVDF 膜或硝酸纤维素膜上,转移过程所产生的热量远远小于普通转膜缓冲液,从而减小对蛋白的损失。
本产品安全无毒害,使用前仅需用水和乙醇稀释至 1×(能在 15-35 分钟内快速完成转膜全过程)。 本产品转膜效率高,能在 15-35 分钟内快速完成转膜过程。本产品稳定性高,产热量小,减少对蛋白的损失。本产品兼容性好,对分子量跨度大的蛋白同样适用,有效解决大小蛋白不能在同一张膜上同时转移的问题,兼容 Tris-Gly 体系、Hepes 体系、Bis-Tris 体系等多种凝胶。
注意事项:
1. 当转膜液长时间在 2-8℃存放,若出现沉淀,可在水浴锅中温育并充分溶解后继续使用。
2. 注意在使用乙醇时,不要求必须使用无水乙醇,如使用含水乙醇,请按照试剂中乙醇实际浓度计算加入量。
3. 湿转转膜时电转仪外无需额外冰浴,即可确保无过热现象,如若希望更为快速地完成转膜,可使用 400mA 或更高的电流进行恒流转膜。
4. 本品仅供科研使用,勿做其他用途。
5. 为了您的安全和健康,请全程穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明:
1. 1×快速转膜液使用前的配制方法:
如配制 1L 的 1×快速转膜液请参考下表:
快速转膜液(10×) 100mL
无水乙醇 200mL
超纯水 700mL
准备 5-6 张裁剪好的滤纸和转印膜,如若使用 PVDF 膜需提前用无水甲醇浸泡至少10 秒以上,再放在 1×快速转膜液中。
2. 操作步骤及转膜条件:
①将滤纸和海绵浸泡于 1×快速转膜液中,务必完全浸湿。
②将凝胶在超纯水中漂洗 2 分钟,以去除胶表面的 SDS;然后将凝胶浸泡于 1×快速转膜液中。
③请注意:漂洗时间切勿超过 2 分钟,否则分子量较大的蛋白无法完全转移。
3. 请按照以下顺序完成转印三明治结构:
→负极(阴极)→海绵→滤纸→凝胶→转印膜→滤纸→海绵(根据三明治的厚度选择是否使用) →正极(阳极)
将三明治结构转移至电泳槽中,设定恒流 400 mA,电泳时间 15-35 分钟完成蛋白转膜
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