| 使用方法 (核酸末端去磷酸化): DNA-5’末端 1 pmol 10×SAP Buffer 2 μl rSAP (2U/μl) 0.5μl ddH2O Up to 20 ul 37°C 孵育 30min。65°C 孵育 5min 进行失活反应。 (1)1×SAP Buffer:50 mM Bis-Tris HCl pH 6.0,1mM MgCl2,0.1 mM ZnCl2,25℃ 温育。 (2)热失活:65℃ 加热 5 分钟,不可逆失活。该酶通常用于酶切载体的去磷酸化,因其不可逆热失活特性。当完成去磷酸化反应后,无需再纯化产物,可以直接用于后续连接反应。 (3)虾碱性磷酸酶也可以用来降解PCR反应中的游离dNTP,用于制备测序模板和 SNP 分析。同样无需纯化,可直接用于下游实验。 |