产品名称：重组TEV酶 (GST/His标签)

规格或纯度：生物活性, 重组, EnzymoPure™, His标签, GST标签, ≥95%(SDS-PAGE), ≥1 U/μL；expressed in E.coli

产品介绍：

TEV 蛋白酶 (His+GST 标签) 是一种在大肠杆菌中重组表达的带 His、GST 双标签的来源于烟草蚀纹病毒 (TEV) 的半胱氨酸蛋白酶，能特异性地识别七肽序列 Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln-Gly/Ser，并在 Gln 和 Gly/Ser 氨基酸残基之间进行酶切，常用于去除融合蛋白的 GST、His 或者其它标签的蛋白酶。TEV 蛋白酶 (His+GST 标签) 酶切上述七肽序列，标签蛋白被酶切后，在目的蛋白的 N 端仅有一个额外的 Gly/Ser 氨基酸残基，最大限度地减少了对目的蛋白结构和功能的影响。TEV 蛋白酶另一显著优点是在 400mM 咪唑中仍有较高活力，因此对于很多用镍柱纯化的带 His 或 GST 标签目的蛋白，可直接将 TEV 蛋白酶加入含高浓度咪唑的蛋白溶液中，在 4℃透析去除咪唑的同时进行酶切。也可以在透析后再用 TEV 蛋白酶进行酶切以去除标签。

TEV 蛋白酶 (His+GST 标签) 适用于酶切带有 His 或 GST 标签的重组蛋白，因为酶切后没有完全酶切的重组蛋白、切除的 His 标签、GST 标签以及 TEV 蛋白酶 (His+GST 标签) 都可以结合于 His 或 GST 纯化介质上而被除去，穿柱液中则含有所需的靶蛋白。

用 途

生物工程下游技术中融合蛋白酶切使用的重要工具酶

可用于 TEV 蛋白酶识别位点的融合蛋白的切割。

推荐酶切条件：

使用注意事项：

1）TEV 蛋白酶的最佳酶切温度是 30℃，在 29-34℃范围内均具有较高的酶活性，当温度达到或高于 37℃时，其酶活性会急剧下降。在实际操作过程中，为尽量保留目的蛋白的结构和生物活性，建议在 4℃用 TEV 蛋白酶切过夜。TEV 蛋白酶在 pH6.0-9.0 范围内具有活性，而当 pH 小于或等于 5 时，会失去酶活性。

2）TEV 蛋白酶的活性不会被常见的丝氨酸蛋白酶抑制剂如 PMSF、AEBSF、Bestatin、Pepstatin、E-64、TLCK 和 EDTA 所抑制。但靶向半胱氨酸残基的蛋白酶抑制剂如 NEM 或 IAA 等，可以显著抑制 TEV 蛋白酶的酶活性，因为天然的 TEV 蛋白酶含有其维持酶活性所必需的 Cys151。

推荐使用条件

储存缓冲液：25 mmol/L Tris-HCl (pH8.0), 150 mmol/L NaCl, 1 mmol/L EDTA, 5 mmol/L DTT, 50%(v/v) 甘油。

10×TEV Buffer：500 mmol/L Tris-HCl (pH8.0), 250 mmol/L NaCl, 5 mmol/L EDTA, 10 mmol/L DTT。

储存条件

温度：-25℃ ~ -5℃ 保存（注：避免温度低于 - 25℃发生冻结；若长时间冻结会导致活性部分丧失。）

有效期：24 个月。

生物活性：≥1 U/μl

Accession #：P04517

级别：生物活性, 重组, EnzymoPure™, His标签, GST标签

储存缓冲液：25 mmol/L Tris-HCl, 150 mmol/L NaCl, 1 mmol/L EDTA, 5 mmol/L DTT, 50%(v/v) Glycerol, pH8.0.

浓度：≥1 U/μL；expressed in E.coli

储存条件：-20°C储存,避免反复冻融

运输条件：超低温运输

稳定性与储存：长期储存-20℃（24个月）；收货后建议分装，避免反复冻融。 （注：避免温度低于 - 25℃发生冻结；若长时间冻结会导致活性部分丧失。）

CAS编号和信息：139946-51-3

酶学委员会编号：EC 3.4.22.44

单位定义：1 个活性单位（U）是指在 30℃，pH 8.0 条件下反应 1h，能够切割 3μg 对照底物达 85% 以上所需的酶量。

Accession #：P04517

生物活性：≥1 U/μl

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