一、适用范围

黄曲霉B1试剂盒可定性、定量检测玉米、大米、麦类、豆类、花生、饲料、食用油等样本中的黄曲霉毒素B1。

二、试验原理

采用竞争ELISA，在微孔板上预包被黄曲霉毒素B1抗原，加入样本（或黄曲霉毒素B1标准品溶液）及辣根过氧化物酶标记的黄曲霉毒素B1抗体。样本或标准品溶液中的黄曲霉毒素B1与预包被在板孔上的黄曲霉毒素B1抗原竞争结合辣根过氧化物酶标记的黄曲霉毒素B1抗体。与样本或标准品溶液中的黄曲霉毒素B1结合的酶标抗体在洗涤时被除去。再加入TMB显色液，读取吸光值。样本的吸光值与其所含残留物黄曲霉毒素B1抗原的含量成负相关。对照标准曲线，即可得出相应残留物黄曲霉毒素B1的含量。

三、注意事项

1. 室温低于20℃或试剂及样本没有回到室温（20～25℃）会导致所有标准的OD值偏低。

2. 在洗板过程中如果出现板孔干燥的情况，则会出现标准曲线不成线性，重复性不好的现象。所以洗板拍干后应立即进行下一步操作。

3. 每加一种试剂前需将其摇匀。

4. 反应终止液为2M盐酸，避免接触皮肤。

5. 不要使用过了有效日期的试剂盒；也不要使用过了有效期的试剂盒中的任何试剂，掺杂使用过了有效期的试剂盒会引起灵敏度的降低；不要交换使用不同批号试剂盒中的试剂。

6. 储存条件：

保存试剂盒于2～8℃，不要冷冻，将不用的酶标板微孔板放进自封袋重新密封。标准物质和无色的发色剂对光敏感，因此要避免直接暴露在光线下。保存期：黄曲霉B1试剂盒有效期为12个月。

7. 试剂变质的迹象：

发色试剂有任何颜色表明发色剂变质，应当弃之。0标准的吸光度（450/630nm）值小于0.5（A_450nm<0.5）时，表示试剂可能变质。

8. 在加入底物液A液和底物液B液后，一般显色时间为20～30min即可。若颜色较浅，可延长反应时间到35min（或更长），但不得超过40min。反之，则减短反应时间。

9. 该试剂盒最佳反应温度为25℃，温度过高或过低将导致检测吸光度值和灵敏度发生变化。