TSKgel 疏水色谱柱
发布时间: 2013-03-01 13:53
来源:东曹(上海)生物科技有限公司
在疏水作用色谱法(HIC)中,弱非极性固定相与高浓度的盐的水溶液同时使用。该方法主要通过减少盐的浓度来分离蛋白。
在反相色谱中,蛋白通过与填料上烷基或芳基相互作用保留下来。
不同于反相色谱,在疏水反应色谱中上述官能团的密度较低,且蛋白分子只在一个或少数几个位置上吸附。
盐浓度较高时会产生吸附作用,但若加入低百分比浓度的有机溶剂降低盐浓度,则会产生脱附作用。
尽管二者均以疏水作用为基础,但HIC分离的选择性明显不同于反相LC。
相对于RPC,HIC的最高容量较低,但其优势在于:流动相条件(主要是含水流动相)通常不会破坏高阶蛋白质结构。
TSKgel HIC由三种从低到高不同疏水性的配体(丁基、醚和苯基)键合在聚甲基丙烯酸酯上的填料组成的
醚柱与苯基柱所用的聚甲基丙烯酸酯基树脂是一种多孔材料,孔径大小为1000A,排阻限为1,000,000道尔顿,能提供高载量与高上样量。TSKgel Butyl-NPR具有无孔基质。在该基质上,只有颗粒表面能进行吸附。较短的运行时间和良好的回收率使丁基柱成为高通量或QC分析的最佳选择。三种柱类型之间的比较请详见下图。
常规型HIC柱与无孔HIC柱的比较
特性 | 用途 | |
TSKgel Phenyl-5PW | 疏水性最高 | 仅需普通盐含量即可保留蛋白质。适合最广疏水性范围的通用柱。 |
TSKgel Ether-5PW | 疏水性较低 | 疏水蛋白质(如膜蛋白质或单克隆抗体类)的良好选择。. |
TSKgel Butyl-NPR | 疏水性最低 | 高速分析的良好选择。高回收性通常归因于无孔隙。 |
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