食品安全ELISA试剂盒
黄曲霉毒素B1检测
| 品牌 | 厂商性质 | 产地 | 货期 |
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产品介绍
生物及食品酶法分析试剂盒,T-2毒素快速检测试剂,黄曲霉毒素M1检测试剂
黄曲霉毒素B1检测
的详细介绍
| 黄曲霉毒素B1检测试剂 酶标免疫分析定量测定黄曲霉毒素B1试剂盒。德国公司R-Biopharm制造（中文翻译件仅供参考，以试剂盒内附的英文原件为准） RIDASCREEN Aflatoxin B1 30/15（产品编号：R1211） 简介 采用竞争酶标免疫法定量测定谷物，饲料，花生，干果及其它食品中的黄曲霉毒素B1。试剂盒中包括了所有检测用的试剂。该试剂盒有96个试验孔包括标准试验，如果进行定量分析，必须有微孔板酶标仪。 样品制备 谷物/饲料：粉碎，甲醇/水提取，过滤，稀释 时间要求：（以10个样品为例） 谷物/饲料………………………………….……大约30分钟 测试时间………………………………………….大约1小时 （与样品数量多少无关） 检测下限 1ppb 回收率 80-100% 交叉反应 Aflatoxin B1…………………………………………….100% Aflatoxin G1…………………………………………..大约29% Aflatoxin B2………………………………………….大约13% Aflatoxin G2…………………………………………大约3.2% Aflatoxin M1…………………………………………大约1.5% 1. 用途 Aflatoxin B1 30/15竞争酶标免疫法定量测定谷物，饲料中的黄曲霉毒素B1。 2. 概要 黄曲霉毒素主要是两种霉菌Aspergillus flavus 及 A.paraticus的二级代谢物。这些霉菌在湿热的环境和耕作土地上污染的植物产生。黄曲霉毒素B1属于自然最强烈的致癌物质。 黄曲霉毒素B1作为毒性最高的的分析物，它一般产生于玉米，花生，巴西坚果和棉花种子中。 鉴于这种霉菌毒素的毒性，欧洲国家做出了相近的限量，对黄曲霉毒素B1的限量为2ppb，对黄曲霉毒素总量的限量为4ppb。 使用RIDASCREEN Aflatoxin B1 30/15检测试剂盒，能够快速而准确的检测谷物，饲料和其他食品中的黄曲霉毒素B1。 3. 测定原理 测定的基础是抗原抗体反应。微孔板包被有针对黄曲霉毒素B1抗体的捕捉抗体。加入标准或样品溶液、黄曲霉毒素酶标记物和黄曲霉毒素抗体。游离黄曲霉毒素与黄曲霉毒素酶标记物竞争结合黄曲霉毒素抗体，同时黄曲霉毒素抗体与固定在板孔的捕捉抗体相连接。没有连接的酶标记物在洗涤步骤中被除去。将酶基质/发色剂加入到孔中并且孵育。结合的酶标记物将微红色的发色剂转化为蓝色的产物。加入反应停止液后使颜色产生由蓝色变成黄色。在450nm处测量，吸光值与样品中的浓度成反比。 4. 提供的试剂 每一个盒中的试剂足够进行96个测量（包括标准测定孔） 盒中的材料如下 1×96孔板（12条 X 8孔）包被有捕捉抗体 6×黄曲霉毒素B1标准液，1.3 ml/瓶 浓度为：0ppb，1ppb， 5ppb，10ppb，20ppb，50ppb 黄曲霉毒素B1的甲醇/水溶液 1×酶标记物（6ml）………………………………….红色帽 过氧化物酶标记物的黄曲霉毒素B1 1×黄曲霉B1抗体（6ml）……………………………黑色帽 1×基质/发色剂（10ml）……………………………..蓝色帽 1×反应停止液（14ml）...….…………………... ……黄色帽 为1N硫酸 1×洗涤缓冲液 为10Mm的磷酸缓冲液（pH7.4），包含0.05%的Tween20 * 样品的10倍稀释倍数已经考虑，因此，样品中黄曲霉B1的浓度可以直接在标准曲线读取。 5. 需要的材料但盒中不提供 5.1设备 －－－－微孔板酶标仪（450nm）定量分析用 －－－－100ml量筒 －－－－样品提取用玻璃器皿：漏斗、50ml容量瓶 －－－－粉碎机 －－－－振荡器 －－－－Whatman NO.1或相当的滤纸 －－－－50ul，100ul，1000ul微量加样器 5.2 试剂 －－－－甲醇 －－－－70%甲醇溶液：准备70%甲醇溶液，70ml甲醇与30ml蒸馏水混合。 －－－－蒸馏水或去离子水 6. 操作者应该注意之事项 －－－－标准液含有黄曲霉毒素B1，要特别小心，应戴手套，避免试剂接触皮肤 －－－－使用过的玻璃容器最好用pH7的次氯酸溶液（10%V/V）浸泡过夜 －－－－反应停止液为1N硫酸，避免接触皮肤 －－－－不要使用过了有效日期的试剂盒，稀释或搀杂使用会引起 灵敏度的降低 －－－－不要交换使用不同批号的盒中试剂 7. 储存条件 －－－－保存试剂盒于2-80C。不要冷冻 －－－－将不用的微孔板放进原锡箔袋中并且与提供的干燥剂一起重新密封 －－－－标准物质对光敏感，因此要避免直接暴露在光线下 －－－－基质/发色剂对光敏感，因此要避免直接暴露在光线下 8. 试剂变质的迹象 红的基质/发色试剂若显蓝色表明发色剂变质，应当弃之。 0标准的吸光度值小于0.6个单位 （A450nm<0.6）时，表示试剂可能变质。 9. 样品处理 样品应当在阴凉避光之处保存 在分析前将代表性的样品粉碎，彻底混均 －－－－称取5g 粉碎的样品于适当容器中，加入25ml 70%甲醇溶液 －－－－强力振荡3分钟（用手或振荡器） －－－－用Whatman NO.1或相当的滤纸进行过滤 －－－－取1ml滤液加入1ml蒸馏水稀释 －－－－取50ul稀释液用于试剂盒分析 *根据需要可以增加样品量，但甲醇溶液的量也应相应增加 （例如：样品10g+50ml 70%甲醇溶液） 注意 如果样品中黄曲酶毒素的浓度比预计的浓度高，样品需要进一步稀释。请注意加入到微孔中分析的样品必须是比例为35/65的甲醇/水溶液。 10. 酶标免疫分析程序 10.1测定之前注意事项 1. 用之前将所有试剂回升至室温（20-25℃）。 2. 使用之后立即将所有试剂放回2-8℃。 3. 在使用中不要让微孔干燥。 4. 在EIA分析中的再现性，很大程度上取决于洗板的一致性，仔细按照推荐的洗板顺序操作是EIA测定程序中的要点。 5. 在所有恒温孵育过程中，避免光线照射，用盖子盖住微孔板。 10.2包被有抗体的微孔板条 锡箔袋沿横向边压封线外侧剪开。取出需用数量的微孔板及框架，将不用的微孔板放进原锡箔袋中并且与提供的干燥剂一起重新密封，保存于2-80C。不要冷冻. 10.3标准液 黄曲霉毒素B1标准液直接应用，样品的10倍稀释倍数已经被考虑，因此，样品的黄曲霉B1的浓度可以直接在标准曲线读取。 10.4 洗涤缓冲液 在试剂盒中提供一包洗涤缓冲液的粉剂，一包粉剂溶解于1升的蒸馏水中，制备好的洗涤缓冲液在4oC条件下保存4周。 方法二： 将小袋里粉剂只用100ml蒸馏水溶解得到一个10倍的缓冲液浓缩液。此溶液在室温（20-25°C）下，可保存8周。 使用时，1倍的浓缩液+9倍的蒸馏水稀释即可得到待用的洗涤缓冲液 10.5测定程序 （在20-25 oC条件下操作） 1．将足够标准和样品所用数量的孔条插入微孔架，标准及样品做平行，并记录标准及样品的位置。 2.加入50ul的标准或处理好的样品到各自的微孔中，每个标准和样品必须使用新的吸头。 3.加入50ul酶标记物（红色帽）到微孔底部。 4.加入50ul黄曲霉抗体（黑色帽）到微孔底部，轻轻地在桌面振摆酶标板，使之混合。在室温（20-25 oC）孵育30（+/-1）分钟 5.倒出孔中的液体，将微孔架倒置在吸水纸上拍打以保证完全除去孔中的液体。每孔注入250ul洗涤缓冲液。再次倒出孔中的液体，完全除去孔中的液体，重复操作洗涤步骤两次以上。 6.加入100ul基质/发色试剂（蓝色帽）到微孔中，充分混合并在室温暗处孵育15（+/-1）分钟。 7.加入100ul反应停止液到微孔中，混合好在450nm处测量吸光度值，以空气为空白，15分钟内读取光度值。 11. 结果 所获得的标准和样品吸光度值的平均值除以第一个标准 （0标准） 的吸光度值再乘以100。因此0标准等于100%并且以百分比给出吸光度值。 标准的吸光度值（或样品） －－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－x 100= %吸光度值 0标准的吸光度值 计算的标准值绘成为一个以黄曲霉毒素B1浓度（ng/kg）的半对数坐标系统曲线图，校正曲线在5-20ppb范围内应当成为线性，相对应每一个样品的浓度可以从标准曲线上读出。 |
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注：该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案，不可用于临床诊断或治疗等相关用途