TweenTrap 色谱柱,Protein A

　　赛分科技TweenTrap 色谱柱是专为去除水性样品中的表面活性剂（例如吐温）而设计的。填料是由刚性、球形、高交联度、粒径为5 µm的PS/DVB制成。将专有的表面涂层共价键合到PS/DVB载体上，从而实现极高的稳定性及对目标化合物的最小非特异性结合。共价结合的两亲官能团能够吸附脂溶性和水溶性的去污剂（例如吐温）。色谱柱兼容于大多数水相缓冲液，比如醋酸盐、磷酸盐、Tris和其他。

　　TweenTrap 色谱柱可以与SEC色谱柱串联运行水性样品，并且专门设计用于收集和去除表面活性剂，比如干扰蛋白质SEC定量分析的聚山梨酯 80/20（吐温 80/吐温20）。为了获得最佳结果，建议TweenTrap运行水基流动相，不添加有机溶剂。

技术参数

产品名称	TweenTrap
填料	高度交联的PS/DVB树脂载体接枝有致密堆积的纳米级厚度两亲涂层
粒径	5 µm
孔结构	无孔
pH稳定性	2-13
操作温度极限	80℃
操作压力极限	5000 psi（344bar）
流动相兼容性	典型缓冲液：磷酸盐、Tris和乙酸盐。有机添加剂会洗掉Tween和其他表面活性剂
流速	色谱柱内径为4.6 mm时通常为0.1-1.0 mL/min

4.6 x 35 mm色谱柱默认容量

吐温 80 浓度	进样体积	#达到色谱柱容量之前的进样量
0.01%	100 µL	20
0.04%	100 µL	5

　　如图1和图2所示，赛分Tween Trap色谱柱在市售重组单克隆抗体（mAb）西妥昔单抗的二聚体与单体分布的谱图中能够最小化吐温的干扰。

图1. TweenTrap色谱柱在西妥昔单抗的SEC分析中的影响

色谱柱: TweenTrap

流动相: 150 mM Sodium phosphate, pH7.0

流速: 1 mL/min

柱温: 室温

检测波长: UV 214 nm

进样体积: 100 µL

样品: 如图所示

图2. 图1的放大交错视图

　　线 1 显示了单独西妥昔单抗的 SEC分析（不含吐温）。单体前面可以看见清晰的聚集峰。

　　线 2 显示了0.04% 吐温80中西妥昔单抗的SEC分析（未串联TweenTrap色谱柱）。根据只含吐温80的色谱图（线 3 ），聚集峰的左边肩前应该是吐温80。这表明吐温80可能会干扰西妥昔单抗的定量分析。

　　线 5显示了吐温80干扰最小化的曲线，这是由于串联了赛分TweenTrap色谱柱。以同样的色谱柱条件再运行一遍仅含西妥昔单抗、不含吐温80的样品，进一步证明了这一点（线 4）。

　　因此，图1和图2中的色谱叠加图有助于证明西妥昔单抗样品中吐温80是如何被截留在赛分TweenTrap色谱柱上，同时仍然可以有效的分辨和积分聚集峰。可以看到西妥昔单抗聚集体在所有线上的峰型略有不同，这可能归因于TweenTrap色谱柱上西妥昔单抗聚集体的相互作用，或者是因为增加了色谱柱死体积，用户可能需要对这种效果采取预防措施。

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