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JM109感受态细胞

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产品介绍

产品简介:
      JM109感受态细胞是采用大肠杆菌JM109菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的化学转化。使用PUC57质粒检测,转化效率可达107~108
 
用   途:
    一种琥珀抑制型F′重组缺陷菌株,该菌株支持M13噬菌体载体的生长,对转染的DNA有修饰作用但无限制作用。该菌种中的F′带有lacZΔM15基因,其可以与λZAP中编码的β-半乳糖苷酶的氨基端进行α互补。从而进行蓝白斑筛选试验(含有重组基因的菌落为白色)。
 
使用方法:

  1. 将100μl感受态细胞于冰上解冻。应注意所用DNA体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一。
  2. 取5μl连接产物加入到感受态细胞中,轻轻旋转几次以混匀内容物。在冰上放置30 min。
  3. 将管放入预加温到42℃的水浴中,热激90秒。快速将管转移到冰浴中,使细胞冷却2~3 min。该过程不要摇动离心管。
  4. 每管中加900μl LB(SOC)培养基(不含抗生素),37℃振荡培养1h。目的是使质粒上相关的抗性标记基因表达,使菌体复苏。
  5. 室温4,000rpm离心5min,弃去900μl上清后,用剩余100μl培养基重悬细胞并涂布到LB琼脂平板表面。
  6. 将平板置于室温直至液体被吸收。
  7. 倒置平皿,于37℃培养,12~16h后可出现菌落。
 
储存条件:-70℃冻存                           
 
注意事项:

  1.  感受态应保存在-70℃,不可多次冻融和放置时间过长,运输过程中应放入干冰中。
  2.  实验操作过程应严格无菌,防止其他DNA污染,以免为以后的筛选、鉴定带来影响。
  3.  为防止转化实验不成功,可以保留部分连接反应液,以重新转化,将损失降到最低。
 
产品包装:


组成名称 KT1008-01 KT1008-02
感受态细胞 10x100μl 20x100μl
PUC57(0.1ng/μl) 10μl    10μl
说明书 1份    1份
 
 
 
 
 
                                        

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注:该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案,不可用于临床诊断或治疗等相关用途