概述
本试剂盒是应用ELISA技术研发而成的检测产品，具有快速、简便、准确和灵敏度高等优点，操作时间需45min，能减少操作误差和工作强度。
检测步骤
1、将所需试剂从冷藏环境中取出，置于室温（20~25℃）平衡30min以上，注意每种液体试剂使用前均须摇匀。若试剂中有晶体析出，回温溶解后方可使用。
2、取出需要数量的微孔板，将不用的微孔放入锡箔袋，保存于2~8℃。
3、洗涤液【配液1】在使用前也需回温。
4、编号：将样本和标准品对应微孔按序编号，每个样本和标准品做2孔平行，并记录标准孔和样本孔所在的位置。
5、加标准品/样本：加标准品或样本100μL/孔到对应的微孔中，然后加入四环素类酶标物50μL/孔，再加入四环素类抗试剂50μL/孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置于25℃避光环境中反应30min。
6、洗板：小心揭开盖板膜，将孔内液体甩干，用洗涤液【配液1】250μL/孔，充分洗涤4~5次，每次间隔10s，用吸水纸拍干（拍干后未被清除的气泡可用未使用过的枪头戳破）。
7、显色：加入底物液A液50μL/孔，再加底物液B液50μL/孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置于25℃避光环境反应15min。
8、测定：加入终止液50μL/孔，轻轻振荡混匀，设定酶标仪于450nm处（建议用双波长450/630nm检测，请在5min内读完数据），测定每孔OD值。（若无酶标仪，则不加终止液用目测法可进行判定）。
注意事项
1、室温低于 20℃或试剂及样本没有回到室温（20～25℃），会导致所有标准的 OD 值偏低。
2、在洗板过程中如果出现板孔干燥的情况，则会出现标准曲线不成线性，重复性不好的现象。所以洗板拍干后应立即进行下一步操作。
3、每加一种试剂前需将其摇匀。
4、反应终止液为 2M 硫酸，避免接触皮肤。
5、不要使用过了有效日期的试剂盒，也不要使用过了有效期的试剂盒中的任何试剂；掺杂使用过了有效期的试剂盒会导致灵敏度降低；不要交换使用不同批号试剂盒中的试剂。
6、储存条件保存试剂盒于 2～8℃，切勿冷冻，将不用的酶标板微孔板放进锡箔袋重新密封。标准物质和无色的发色剂对光敏感，因此要避免直接暴露在光线下。
7、试剂变质的迹象发色试剂有任何颜色表明发色剂变质，应当弃之。0 标准的吸光度（450/630nm）值小于 0.5（A450nm<0.5）时，表示试剂可能变质。
8、在加入底物液A 液和底物液 B 液后，一般显色时间为15min。若颜色较浅，可延长反应时间到 20min，但不得超过 20min。反之，则减短反应时间。
9、浓缩洗涤液如有结晶属正常现象，请加热溶解后使用。
10、该试剂盒最佳反应温度为 25℃，温度过高或过低将导致检测吸光度值和灵敏度发生变化。
