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双链DNA酶,≥90%
品牌 | 厂商性质 | 产地 | 货期 |
---|---|---|---|
阿拉丁 | 总代理 | 中国 | 现货 |
性能特点
产品组成 货号 组分 规格 D397988A-50μl dsDNase 50μl D397988B-200μl 10× dsDNase Buffer 200μl 产品简介dsDNase 是一种
货号 | 规格 | 价格 | 操作 |
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D397988-1kit | 1kit | ¥1,020.90 | 询底价 |
中文名:双链DNA酶
英文名:dsDNase
纯度:≥90%
货号:D397988
存储温度:-20°C储存
产品介绍:
产品组成
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产品简介
dsDNase 是一种核酸内切酶,能够裂解 DNA 中的磷酸二酯键, 生成带有 5'- 磷酸和 3'- 羟基末端的寡核苷酸。dsDNase 能够特异性的消化双链 DNA(double-stranded DNA, dsDNA)而不会消化单链 DNA、引物、探针和 RNA。dsDNase 具有热敏感性,可在 55℃条件下快速失活。dsDNase 主要用于反转录实验前快速去除 RNA 样本中的基因组 DNA 污染,与传统的使用 DNase I 去除基因组 DNA 污染 的方法相比,无需额外加入 EDTA 失活,可减少对 RNA 的损伤,同时节省实验时间,保证 RNA 水平定量的准确性。
活性定义
根据 Kunitz 实验方法,在 25℃ pH 5.0 的条件下,以过量的大分 子 DNA 为底物,在 260 nm 波长处每分钟能引起吸光度增加 0.001 的 酶量定义为 1 个活性单位(U)。
储存缓冲液
25 mM Tris-HCl (pH7.5,@25℃ ), 2.0 mM MgCl2, 10 mM NaCl, 0.01 % (v/v) Triton X-100, 50 % (v/v) glycerol。
抑制与失活
抑制条件:金属离子、EDTA、SDS、DTT、β- 巯基乙醇、高盐 离子浓度等会抑制 dsDNase 的活性;失活条件:55℃温育 5 min。
质量控制
蛋白质纯度:通过 SDS-PAGE 并考马斯亮蓝染色,该酶纯度 ≥90%。
RNA 酶活性检测:将酶液与 RNA 底物 在 37 温育 1 h,通过凝胶电泳检测没有发现 RNA 底物降解。
功能检测:该产品被用于测试去除来自 RNA 样本中的基因组 DNA 并进行了 RT-qPCR 扩增,发现去除率 ≥99.9%。RNA 数量不受 dsDNase 处理的影响。
使用方法
1. 于冰上配制如下反应体系:
2. 轻轻吹打混匀反应体系后,将以上混合液在 37℃温育 2~5 min; 3. 65℃热失活 2 min,迅速将获得的 RNA 置于冰上,用于后续实验。 长期保存请置于 -80℃,避免反复冻融。 注意事项 1. 若 RNA 样本下游用于 RT-PCR,且目的基因长度 ≥3 kb,失活步骤前 需添加终浓度为 10 mM 的 DTT; 2. 为避免 RNA 降解,可在反应体系中加入适量的 RNase Inhibitor。
常见问题
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