使用涂抹棒、海绵或其它采样设备采集环境样品（湿润采样设备的液体可以根据使用的消毒试剂来选择对应的中和剂，液体体积不超过10mL），混匀后制成样品匀液。吸取样品匀液 1mL，注入含有9mL稀释液的试管内，混匀后成为 1:10 的样品匀液，以此类推，制备10倍系列稀释样品匀液。每递增稀释一次，换用1次1mL无菌吸管或吸头。根据对样品污染状况的估计，选择 2～3 个适宜稀释度的样品匀液（一般情况下直接使用样品匀液原液）。

操作方法

1、沿虚线剪开，打开封口，取出适量测试片。

2、测试片平放在水平实验台上，缓慢揭开上膜。

3、将1mL样品匀液垂直滴加在培养基的中心区域。

4、缓慢盖上上膜，样液会自动扩散至整个培养区域。

5、待样品匀液被完全吸收后，再移动测试片。

6、将测试片透明面向上，正置于培养箱中，36±1℃培养18~24h。测试片堆叠培养时，不宜超过20片。

注意事项

1、揭开上膜时，不要触碰培养基检测区域。
2、测试片正置培养，叠放片数不宜过多。
3、请勿将测试片放置于紫外或日光下直射，也不要将测试片长时间放置于荧光灯下。
4、不要使用已污染的测试片。
5、使用后的测试片存在二次污染的可能性，请高压蒸汽灭菌后再按照相关法律法规处理。
6、测试片可能会出现少量针状黑点，为正常现象，不影响目标菌株的判读。
7、加样后防溢圈附近可能出现气泡导致液体无法完全扩散，为正常现象，不影响检测结果。

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